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ライブ細胞におけるコンソジショナルフレットバイオセンサーを用いたオーロラキナーゼ活性化のリアルタイムモニタリング

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Real-Time Monitoring of Aurora kinase A Activation using Conformational FRET Biosensors in Live Cells

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ライブ細胞におけるコンソジショナルフレットバイオセンサーを用いたオーロラキナーゼ活性化のリアルタイムモニタリング

DOI:

10.3791/61611-v

•

06:29 min

•

July 30, 2020

•

Giulia Bertolin, Gilles Le Marchand, Marc Tramier

¹Univ Rennes, CNRS, IGDR (Genetics and Development Institute of Rennes), UMR 6290, F-35000 Rennes, France

Capitoli

00:04Introduction
00:36Donor/Acceptor Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Pair Selection
01:13Cell Synchronization
01:42FRET/Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM) Acquisitions
02:50Donor/Acceptor Pair Delta Lifetime Calculation and FLIM Value Comparison
03:53Results: Representative Aurora Kinase A (AURKA) FRET Biosensor and Negative Control Images
05:52Conclusion

Summary

Traduzione automatica

多機能Ser/ThrキナーゼAURKAの活性化は、Thr288の自己リン酸化によって特徴付けられます。ここでは、プローブエンジニアリングの戦略と、有糸分裂全体のキナーゼ活性化に従う迅速なFRETプロトコルを示す。

Tags

Real-time Monitoring Aurora Kinase A Conformational FRET Biosensors Live Cells FRET-FLIM Fluorescent Protein Donor-acceptor Pair Cell Synchronization Microscopy Lifetime Mapping Mitotic Spindle

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