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Capitoli
- 00:04Introduction
- 00:36Donor/Acceptor Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Pair Selection
- 01:13Cell Synchronization
- 01:42FRET/Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM) Acquisitions
- 02:50Donor/Acceptor Pair Delta Lifetime Calculation and FLIM Value Comparison
- 03:53Results: Representative Aurora Kinase A (AURKA) FRET Biosensor and Negative Control Images
- 05:52Conclusion
La activación de la quinasa multifuncional Ser/Thr AURKA se caracteriza por su autofosforilación en Thr288. Las sondas fluorescentes que dependen de FRET pueden discriminar entre sus estados inactivo y activado. Aquí, ilustramos algunas estrategias para la ingeniería de sondas, junto con un protocolo FRET rápido para seguir la activación de la quinasa a lo largo de la mitosis.
