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Perfil celular de alto rendimento de compostos de degradação de proteínas direcionadas usando linhas celulares CRISPR HiBiT
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JoVE Journal Ricerca sul cancro
High-Throughput Cellular Profiling of Targeted Protein Degradation Compounds Using HiBiT CRISPR Cell Lines

Perfil celular de alto rendimento de compostos de degradação de proteínas direcionadas usando linhas celulares CRISPR HiBiT

DOI:
10.3791/61787-v

•

05:33 min

•

November 09, 2020

•

, , ,
1Promega Corporation

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:50Endpoint Degradation Studies with HiBiT CRISPR Target Proteins in Lytic Format with Optional Cell Viability Fluorescence Analysis
  • 03:07Results: Degradation Compound Analysis in a HiBiT CRISPR Cell Line
  • 04:51Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Este protocolo descreve a detecção luminescente quantitativa da cinética de degradação de proteínas em células vivas que foram modificadas usando CRISPR/Cas9 para expressar a etiqueta de detecção endógena livre de anticorpos fundida a uma proteína-alvo. Instruções detalhadas para calcular e obter parâmetros quantitativos de degradação, taxa, Dmax, DC 50 e Dmax50 estão incluídas.

Tags

Keywords: High-throughputCellular ProfilingProtein DegradationHiBiTCRISPR Cell LinesDegradation MonitoringQuantitativeHTS ProfilingDegrader CompoundsEndogenous Target ModulationLytic DetectionLuminescenceCell ViabilityFluorescence

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