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Inserção Co-Translacional de Proteínas de Membrana em Nanodiscos Pré-Formados
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Capitoli
- 00:05Introduction
- 00:45S30 Ribosomal Protein Lysate Preparation
- 02:17Membrane Scaffold Protein 1E3D1 (MSP1E3D1) Nanodisc Assembly
- 03:243-mL Continuous Exchange Cell-Free (CECF) Reaction Setup
- 04:1060-Microliter CECF Reaction Setup
- 06:07Results: Representative Preformed Nanodisc-Modified Membrane Protein Characterization
- 07:40Conclusion
A inserção co-translacional em nanodiscos pré-formados torna possível estudar proteínas de membrana sintetizadas livres de células em ambientes lipídicos definidos sem contato com detergentes. Este protocolo descreve a preparação de componentes essenciais do sistema e os parâmetros críticos para melhorar a eficiência da expressão e a qualidade da amostra.
