È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.
1Department of Ophthalmology,University Hospital RWTH Aachen, 2Experimental Ophthalmology,University of Geneva, 3Department of Ophthalmology,University Hospitals of Geneva, 4Université de Paris, CNRS, INSERM, UTCBS, Unité des technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé, 5Chimie ParisTech,PSL Research University, 6Max Delbrück Center for Molecular Medicine in the Helmholtz Association, 7Division of Medical Biotechnology,Paul-Ehrlich-Institute
Capitoli
- 00:05Introduction
- 00:57Primary Human RPE Cell Electroporation and Plasmid DNA Preparation
- 01:57Cultivated Primary Human RPE Cell Preparation
- 03:19His-Tagged Pigment Epithelium-Derived Factor (PEDF) Fusion Protein Purification
- 04:57Results: Representative Primary Human RPE Transfection and Genetic Modification Evaluation
- 06:24Conclusion
We hebben een protocol ontwikkeld om primaire menselijke pigmentepitheelcellen te transfecteren door elektroporatie met het gen dat codeert voor pigmentepitheel-afgeleide factor (PEDF) met behulp van het Transposon-systeem van Doornroosje (SB). Succesvolle transfectie werd aangetoond door kwantitatieve polymerasekettingreactie (qPCR), immunoblotting en enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).
