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Assessing Protein Interactions in Live-Cells with FRET-Sensitized Emission
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FRET感作発光を伴う生細胞におけるタンパク質相互作用の評価(英語)

DOI:
10.3791/62241-v

•

09:15 min

•

April 22, 2021

•

, , , , ,
1Department of Biophysics and Cell Biology, Faculty of Medicine,University of Debrecen, 2Gynecologic Oncology Division,Stanford University School of Medicine

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 01:12Plasmid Construction
  • 01:52Cell Culture and Transfection
  • 02:41FRET Imaging
  • 05:42Image Analysis for Detecting Absolute FRET Efficiencies Using Donor Quenching and Sensitized Emission
  • 07:01Results: Quantification of FRET Images
  • 08:28Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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2つの蛍光色素分子間のフェルスター共鳴エネルギー移動(FRET)は、生細胞におけるタンパク質相互作用の研究に使用できます。ここでは、共焦点レーザー走査顕微鏡を使用してアクセプターの感作放出およびドナー分子の消光を検出することによって、生細胞中のFRETを測定する方法に関するプロトコルが提供される。

Tags

FRETFRET-sensitized EmissionProtein InteractionsLive-cell ImagingDonor QuenchingAcceptor Sensitized EmissionCrosstalkFluorescent ProteinsDetection EfficiencyDonor-acceptor Fusion ProteinEGFP-mCherryCell TransfectionConfocal MicroscopyEnvironmental Chamber

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