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Imagerie en accéléré de l’arborisation neuronale à l’aide du marquage clairsemé du virus adéno-associé à des populations de cellules rétiniennes génétiquement ciblées
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Capitoli
- 00:04Introduction
- 00:58Adeno-Associated Virus (AAV) Preparation and Intravitreal Injection of Neonatal Mice
- 03:13Retinal Dissections for Live-Imaging Experiment
- 05:04Retinal Flat-Mount Preparation
- 06:35Time-Lapse Confocal Imaging of Live Whole-Mount Retina Preparations
- 08:33Image Deconvolution and Post-Processing in ImageJ
- 11:16Results: Representative Results After Neonatal Intraocular Injection, Time-Lapse Imaging, and Deconvolution
- 12:13Conclusion
Nous présentons ici une méthode pour étudier la morphogenèse des neurites dans les explants rétiniens postnatals de souris par microscopie confocale time-lapse. Nous décrivons une approche pour le marquage clairsemé et l’acquisition de types de cellules rétiniennes et de leurs processus fins en utilisant des vecteurs de virus adéno-associés recombinants qui expriment des protéines fluorescentes ciblées sur la membrane d’une manière dépendante de Cre.
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Keywords:
Time-lapse ImagingNeuronal ArborizationSparse Adeno-associated VirusGenetically Targeted Retinal Cell PopulationsSingle-cell LabelingDendritic ArborAxonal ArborNeuronal MorphogenesisConfocal Live ImagingNeonatal Arbor MorphologiesCentral Nervous SystemCre Mouse LineRecombinase-dependent AAVFluorescent ProteinsPlasma MembraneAAV DilutionFast Green FCF DyeNeonatal MiceCorneaIntravitreal SpaceRetinal ACSFCarbogen
