Rivista
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PCR numérique par gouttelettes pour détecter les mutations indels dans les populations de moustiques anophélines génétiquement modifiés
JoVE Journal
Genetica
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JoVE Journal Genetica
Digital-Droplet PCR to Detect Indels Mutations in Genetically Modified Anopheline Mosquito Populations
DOI:

05:51 min

June 28, 2021

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Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:48PCR Preparation and Droplet Generation
  • 02:18PCR
  • 03:03Droplet Reading
  • 03:31Analysis
  • 04:49Results: Implications of ddPCR for NHEJ Identification and Quantification in Transgenic Anopheline Mosquitoes
  • 05:27Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Ce protocole fournit les étapes de l’extraction de l’ADN à la mise en place expérimentale de la PCR numérique des gouttelettes (ddPCR), y compris l’analyse pour l’identification et la quantification des événements de jonction terminale non homologues (NHEJ) sur les sites cibles après le clivage Cas9 induit par l’ARNg et la réparation de l’ADN. D’autres utilisations de cette méthode comprennent des applications telles que la détection de polymorphisme et la vérification des variantes d’édition de gènes.

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