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PCR de gotas digitales para detectar mutaciones de Indels en poblaciones de mosquitos anofelinos modificados genéticamente
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Digital-Droplet PCR to Detect Indels Mutations in Genetically Modified Anopheline Mosquito Populations
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PCR de gotas digitales para detectar mutaciones de Indels en poblaciones de mosquitos anofelinos modificados genéticamente

DOI:
10.3791/62607-v

•

05:51 min

•

June 28, 2021

•

, , , ,
1Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of California, Irvine, 2Department of Molecular Biology & Biochemistry,University of California, Irvine

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:48PCR Preparation and Droplet Generation
  • 02:18PCR
  • 03:03Droplet Reading
  • 03:31Analysis
  • 04:49Results: Implications of ddPCR for NHEJ Identification and Quantification in Transgenic Anopheline Mosquitoes
  • 05:27Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Este protocolo proporciona los pasos desde la extracción de ADN hasta la configuración experimental para la PCR digital de gotas (ddPCR), incluido el análisis para la identificación y cuantificación de eventos de unión final no homólogos (NHEJ) en sitios objetivo después de la escisión Cas9 inducida por gRNA y la reparación del ADN. Otros usos de este método incluyen aplicaciones como la detección de polimorfismo y la verificación de variantes de edición de genes.

Tags

Digital Droplet PCRDdPCRNHEJ AnalysisIndel MutationsGene-edited MosquitoGenetic VariationHigh ThroughputFast TurnaroundField AnalysisGenetically Modified Organisms

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