Rivista
/
Biochimica
/
Визуализация и количественная оценка сигнализации TGFβ/BMP/SMAD в различных условиях напряжения сдвига жидкости с использованием бесконтактного лигирования
JoVE Journal
Biochimica
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Biochimica
Visualization and Quantification of TGFβ/BMP/SMAD Signaling under Different Fluid Shear Stress Conditions using Proximity-Ligation-Assay
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Визуализация и количественная оценка сигнализации TGFβ/BMP/SMAD в различных условиях напряжения сдвига жидкости с использованием бесконтактного лигирования

DOI:
10.3791/62608-v

•

11:38 min

•

September 14, 2021

•

, ,
1Institute for Chemistry and Biochemistry,Freie Universität Berlin, 2International Max-Planck Research School for Biology and Computation

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:40Cell Culture and Fluid Shear Stress Exposure
  • 02:55Fixation
  • 04:58Blocking and Incubation with Primary Antibody
  • 06:28Incubation with PLA Probe and Ligation
  • 07:34Amplification and Mounting
  • 09:14Results: Effect of Shear Stress on the SMAD Protein Interactions
  • 11:02Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Здесь мы устанавливаем протокол для одновременной визуализации и анализа нескольких комплексов SMAD с использованием анализа бесконтактной перевязки (PLA) в эндотелиальных клетках, подверженных патологическим и физиологическим условиям сдвига жидкости.

Tags

Keywords: TGF-β/BMP/SMAD SignalingProximity Ligation AssayFluid Shear StressMicrofluidic Flow ChannelsHUVEC CellsTranscription Factor ComplexesVascular Biology

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

check_url/it/62608?article_type=v

Количественное Бактериальный гистидинкиназа Автофосфорилирование Использование Nitrocellulose Анализ на связывание
check_url/it/62608?article_type=v

Визуализация белокбелковых взаимодействия в ядерной и цитоплазматических фракций Co-иммунопреципитации и<em> В Ситу</em> Пробирной Расстояние Лигирование
check_url/it/62608?article_type=v

Гидролиз Ni-Шифф-Base комплекс Использование Условия Пригодные для удержания кислотно-лабильных защитных групп
check_url/it/62608?article_type=v

Обнаружение и визуализация ДНК-индуцированных белковых комплексов в суспензионных клеточных культурах с использованием анализа лигирования близости
check_url/it/62608?article_type=v

Оценка влияния агрегации белков на сотовой окислительный стресс в дрожжи
check_url/it/62608?article_type=v

Обнаружение Heterodimerization изоформ белка, используя Assay в Situ близости лигирование
check_url/it/62608?article_type=v

Количественная оценка динамики взаимодействия белков с использованием мультиплексного со-иммунопрециации
check_url/it/62608?article_type=v

Средняя подготовка к культивированию микроорганизмов в строго анаэробных/аноксических условиях
check_url/it/62608?article_type=v

Количественная оценка коэнзима А в клетках и тканях
check_url/it/62608?article_type=v

Визуализация рецепторов эстрогена в колонах мышей с TNBS-индуцированной болезнью Крона с использованием иммунофлюоресценции

Read Article