This content is Free Access.
Capitoli
- 00:10Introduction
- 01:06Yeast Cell Culture and FIxation
- 03:58Yeast Cell Disruption and Cytosol Collection
- 05:45Mammalian Cell Culture and Fixation
- 09:40Mammalian Cell Disruption and Cytosol Collection
- 11:02Risultati
- 13:41Conclusion
Представлена методика быстрой стабилизации поступательных (белковый биосинтез) комплексов со сшиванием формальдегида в живых дрожжевых и млекопитающих клетках. Этот подход позволяет препарировать переходные промежуточные продукты и динамические взаимодействия РНК:белок. Сшитые комплексы могут использоваться в нескольких последующих приложениях, таких как методы профилирования на основе глубокого секвенирования, микроскопия и масс-спектрометрия.
Tags
Keywords:
In Vivo FixationTranslational ComplexesEukaryotic CellsRapid ChillingFormaldehyde FixationGlycine QuenchingCell LysisRibosomal FractionsAffinity PurificationRNA AnalysisMass SpectrometryYeast CultureExponential Growth PhaseFormaldehyde ConcentrationFixation TimeCell PelletingGlycine Buffer
