/

/

Manuel blot-og-plunge frysning af biologiske prøver til enkelt-partikel kryogen elektronmikroskopi

JoVE Journal
Biochimica
Author Produced

È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo. Accedi o inizia la tua prova gratuita.

JoVE Journal Biochimica

Manual Blot-and-Plunge Freezing of Biological Specimens for Single-Particle Cryogenic Electron Microscopy

Manuel blot-og-plunge frysning af biologiske prøver til enkelt-partikel kryogen elektronmikroskopi

DOI:

10.3791/62765-v

•

09:16 min

•

February 07, 2022

•

Hoang P. M. Nguyen*¹, Kelly L. McGuire*¹, Brian D. Cook*¹, Mark A. Herzik, Jr.

¹Department of Chemistry and Biochemistry,University of California, San Diego

Capitoli

00:04Introduction
00:22Prepare the Manual Plunging Environment
00:42Prepare the Cryogen Dewar and Manual Plunger
02:04Prepare the Cryogen
04:36Prepare Plunging Materials and Accessories
05:13Prepare CryoEM Specimens by Plunge Freezing
07:22Representative Results
07:50Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Dette manuskript skitserer blot-and-plunge metode til manuelt at fryse biologiske prøver til enkelt-partikel kryogen elektronmikroskopi.

Tags

Manual Blot-and-plunge Freezing Biological Specimens Single-particle Cryogenic Electron Microscopy Transmission Electron Microscopy Cryogen Dewar Manual Plunger Ethane Vessel Plunging Arm Cryogen Preparation Liquid Nitrogen Ethane Gas

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

High-resolution single particle analyse fra elektronkryo-mikroskopi billeder ved hjælp af SPHIRE

Analyse af β-Amyloid-induceret afvigelser Fibrin blodprop strukturen af spektroskopi og Scanning elektronmikroskopi

Proteinekspression og -oprensning af menneskelige Lipid-følsomme kation kanal TRPC3 for Strukturbestemmelse af enkelt-partikel kryo-elektronmikroskopi

Produktion af dynein og Kinesin motor ensembler på DNA origami nanostrukturer til observation af et enkelt molekyle

Hurtig gitterforberedelse til tidstilslutt kryo-elektronmikroskopi

Forberedelse af lameller fra glasagtige biologiske prøver ved hjælp af et dobbeltstrålescanningselektronmikroskop til kryo-elektrontomografi

Enkelt partikel kryo-elektronmikroskopi: Fra prøve til struktur

Micropatterning Transmission ElektronMikroskopiGitre til direkte cellepositionering i hele celle kryo-elektrontomografi arbejdsprocesser

Kvantificering af subcellulær glykogenfordeling i skeletmuskelfibre ved hjælp af transmissionselektronmikroskopi

En robust arbejdsgang for behandling af kryo-elektronmikroskopi (cryo-EM) med cryoSPARC, RELION og Scipion

Read Article