Rivista
/
Biologia
/
Procesontwikkeling voor de productie en zuivering van Adeno-geassocieerd virus (AAV)2 Vector met behulp van Baculovirus-Insect Cell Culture System
JoVE Journal
Biologia
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Biologia
Process Development for the Production and Purification of Adeno-Associated Virus (AAV)2 Vector using Baculovirus-Insect Cell Culture System
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Procesontwikkeling voor de productie en zuivering van Adeno-geassocieerd virus (AAV)2 Vector met behulp van Baculovirus-Insect Cell Culture System

DOI:
10.3791/62829-v

•

10:31 min

•

January 13, 2022

•

, , ,
1Division of Experimental Hematology and Cancer Biology,Cincinnati Children’s Hospital Medical Center, 2University of Cincinnati College of Medicine, 3Raymond G. Perelman Center for Cellular and Molecular Therapeutics,The Children’s Hospital of Philadelphia

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:44Generation of Baculovirus-infected TIPS Cells
  • 03:05Production of AAV Vector
  • 05:08Lysis of Cells and Release of AAV
  • 06:07Purification of AAV Vector Using Affinity Column Chromatography System
  • 08:03Concentration and Diafiltration of AAV Vector Using Tangential Flow Filtration (TFF)
  • 08:54Results: Purification of Adeno-Associated Virus (AAV)2 Vector Using Baculovirus-Insect Cell Culture System
  • 09:48Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

In dit protocol wordt de AAV2-vector geproduceerd door het co-kweken van Spodoptera frugiperda (Sf9) insectencellen met baculovirus (BV)-AAV2-groen fluorescerend eiwit (GFP) of therapeutisch gen en BV-AAV2-rep-cap geïnfecteerde Sf9-cellen in suspensiecultuur. AAV-deeltjes komen vrij uit de cellen met behulp van detergent, worden geklaard, gezuiverd door affiniteitskolomchromatografie en geconcentreerd door tangentiële stromingsfiltratie.

Tags

Keywords: Adeno-associated VirusAAVBaculovirusInsect Cell CultureSf9 CellsTIPS CellsVirus ProductionVirus PurificationFlow CytometryCryopreservation

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

check_url/it/62829?article_type=v

De Methode van Knaagdieren Hele Embryo Cultuur met behulp van de Rotator-type Bottle Cultuur System
check_url/it/62829?article_type=v

Gesloten systeem Cultuur van de Cel Protocol gebruik HyperStack Schepen met een zuurstofdoorlatende Material Technology
check_url/it/62829?article_type=v

De MultiBac Protein Complex Production Platform in het EMBL
check_url/it/62829?article_type=v

De Slice kweekmethode voor Na Ontwikkeling van Tooth Germs In explantaatkweek
check_url/it/62829?article_type=v

Een<em> Ex vivo</em> Cultuur Systeem om Schildklier Development Study
check_url/it/62829?article_type=v

Muis Foetale Hele Darm Cultuur System voor<em> Ex Vivo</em> Manipulatie van signaalwegen en Driedimensionale Live-Imaging van Villus Development
check_url/it/62829?article_type=v

Ontwikkeling van een Insert Co-cultuur systeem van twee mobiele soorten in de afwezigheid van cel-cel Contact
check_url/it/62829?article_type=v

Vet orgel cultuur lichaamssysteem in Aedes Aegypti, een Vector van Zika-Virus
check_url/it/62829?article_type=v

Een kwantitatieve Dot Blot Assay voor AAV titratie en het gebruik ervan voor functionele beoordeling van het Adeno-associated Virus Assembly-activeren eiwitten
check_url/it/62829?article_type=v

Het detecteren van virus- en speekseleiwitten van een leafhoppervector in de plantengastheer

Read Article