Rivista
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바쿨로바이러스-곤충세포배양시스템을 이용한 아데노 관련 바이러스(AAV)2 벡터의 생산 및 정화를 위한 공정 개발
JoVE Journal
Biologia
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JoVE Journal Biologia
Process Development for the Production and Purification of Adeno-Associated Virus (AAV)2 Vector using Baculovirus-Insect Cell Culture System
DOI:

10:31 min

January 13, 2022

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Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:44Generation of Baculovirus-infected TIPS Cells
  • 03:05Production of AAV Vector
  • 05:08Lysis of Cells and Release of AAV
  • 06:07Purification of AAV Vector Using Affinity Column Chromatography System
  • 08:03Concentration and Diafiltration of AAV Vector Using Tangential Flow Filtration (TFF)
  • 08:54Results: Purification of Adeno-Associated Virus (AAV)2 Vector Using Baculovirus-Insect Cell Culture System
  • 09:48Conclusion

Summary

Traduzione automatica

본 프로토콜에서, AAV2 벡터는 바쿨로바이러스(BV)-AAV2-녹색 형광단백질(GFP) 또는 BV-AAV2-rep-cap 감염Sf9 세포를 현탁액 배양에서 감염한 Sf9 세포를 결합하여 스포드옵테라 검거다(Sf9) 곤충 세포를 공동 배양하여 생성된다. AAV 입자는 세제, 명확성, 친화열 크로마토그래피에 의해 정제되며 접선 흐름 여과에 의해 농축됨을 사용하여 세포로부터 방출된다.

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