Rivista
/
Biologia
/
Processutveckling för produktion och rening av Adeno-associerat virus (AAV)2 Vektor med baculovirus-insektscellskultursystem
JoVE Journal
Biologia
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Biologia
Process Development for the Production and Purification of Adeno-Associated Virus (AAV)2 Vector using Baculovirus-Insect Cell Culture System
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Processutveckling för produktion och rening av Adeno-associerat virus (AAV)2 Vektor med baculovirus-insektscellskultursystem

DOI:
10.3791/62829-v

•

10:31 min

•

January 13, 2022

•

, , ,
1Division of Experimental Hematology and Cancer Biology,Cincinnati Children’s Hospital Medical Center, 2University of Cincinnati College of Medicine, 3Raymond G. Perelman Center for Cellular and Molecular Therapeutics,The Children’s Hospital of Philadelphia

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:44Generation of Baculovirus-infected TIPS Cells
  • 03:05Production of AAV Vector
  • 05:08Lysis of Cells and Release of AAV
  • 06:07Purification of AAV Vector Using Affinity Column Chromatography System
  • 08:03Concentration and Diafiltration of AAV Vector Using Tangential Flow Filtration (TFF)
  • 08:54Results: Purification of Adeno-Associated Virus (AAV)2 Vector Using Baculovirus-Insect Cell Culture System
  • 09:48Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

I detta protokoll produceras AAV2 vektor genom samodling Spodoptera frugiperda (Sf9) insektsceller med baculovirus (BV)-AAV2-grönt fluorescerande protein (GFP) eller terapeutisk gen och BV-AAV2-rep-cap infekterade Sf9 celler i suspension kultur. AAV-partiklar frigörs från cellerna med tvättmedel, förtydligas, renas genom affinitetskolonnkromatografi och koncentreras genom tangentiell flödesfiltrering.

Tags

Keywords: Adeno-associated VirusAAVBaculovirusInsect Cell CultureSf9 CellsTIPS CellsVirus ProductionVirus PurificationFlow CytometryCryopreservation

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

check_url/it/62829?article_type=v

Metoden för Gnagare Hela Embryo Culture med Rotator-typ System Bottle Kultur
check_url/it/62829?article_type=v

Slutet system Cell Culture protokoll Använda HyperStack Fartyg med gas genomsläppligt material Technology
check_url/it/62829?article_type=v

Den MultiBac Protein Complex Production Platform vid EMBL
check_url/it/62829?article_type=v

Den Slice Kultur Metod för att följa utveckling av Tand bakterier i Explantation kultur
check_url/it/62829?article_type=v

Ett<em> Ex vivo</em> Kultur systemet studerar Thyroid Utveckling
check_url/it/62829?article_type=v

Mus Fetal Hela tarm Kultur System för<em> Ex Vivo</em> Manipulering av signaleringsvägar och Tredimensionell Live avbildning av Villus Development
check_url/it/62829?article_type=v

Utveckling av en in Co-kultur system av två Cellular typer i frånvaro av cell-cellkontakt
check_url/it/62829?article_type=v

Fett kroppen kultur organsystem i Aedes Aegypti, en vektor av zikaviruset
check_url/it/62829?article_type=v

En kvantitativ Dot Blot analys för AAV titrering och dess användning för funktionell bedömning av den Adeno-associerade Virus församling-aktiverande protein
check_url/it/62829?article_type=v

Detektering av virus- och salivproteiner från en bladhoppvektor i växtvärden

Read Article