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Dalle cellule alla sintesi proteica senza cellule entro 24 ore utilizzando il flusso di lavoro di autoinduzione senza cellule
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From Cells to Cell-Free Protein Synthesis within 24 Hours Using Cell-Free Autoinduction Workflow
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Dalle cellule alla sintesi proteica senza cellule entro 24 ore utilizzando il flusso di lavoro di autoinduzione senza cellule

DOI:
10.3791/62866-v

•

06:08 min

•

July 22, 2021

•

, , ,
1Department of Chemistry and Biochemistry,California Polytechnic State University San Luis Obispo, 2Center for Application in Biotechnology,California Polytechnic State University San Luis Obispo

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:36Media Growth
  • 01:35Cell Harvest
  • 02:34Extract Preparation
  • 03:43Cell-Free Protein Synthesis and Quantification of the Reporter Protein, Super Folder Green Fluorescent Protein (sfGFP)
  • 04:46Results: Comparison Between Cell Extracts Obtained from Cell-Free Autoinduction Media Grown to Optical Densities of 2.5 and 10
  • 05:27Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Questo lavoro descrive la preparazione dell'estratto cellulare di Escherichia coli (E. coli) seguito da reazioni di sintesi proteica senza cellule (CFPS) in meno di 24 ore. La spiegazione del protocollo CFAI (Cell-Free Autoinduction) descrive i miglioramenti apportati per ridurre la supervisione dei ricercatori e aumentare le quantità di estratto cellulare ottenuto.

Tags

Keywords: Cell-free Protein SynthesisCell-free AutoinductionIn Vitro Protein SynthesisCell-free ExpressionEnergy MetabolismE. Coli BL21 StarS30 BufferCell Extract Preparation

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