Rivista
/
/
Provberedning genom 3D-korrelativ fokuserad jonstrålefräsning för högupplöst kryoelektrontomografi
JoVE Journal
Biologia
This content is Free Access.
JoVE Journal Biologia
Sample Preparation by 3D-Correlative Focused Ion Beam Milling for High-Resolution Cryo-Electron Tomography
DOI:

08:20 min

October 25, 2021

, , , ,

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:36Cryo-Fluorescence Light Microscopy (Cryo-FLM) of Plunge‐Frozen Grids with Cells
  • 01:51Focused Ion Beam (FIB) Milling
  • 05:47Correlative Transmission Electron Microscopy (TEM)
  • 07:02Results: Visualizing the Endocytic Protein Deposit in the Cell with Cryo‐ET
  • 07:38Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Här presenterar vi en pipeline för 3D-korrelativ fokuserad jonstrålefräsning för att vägleda beredningen av cellulära prover för kryoelektrontomografi. 3D-positionen för fluorescerande märkta proteiner av intresse bestäms först med kryofluorescensmikroskopi och riktas sedan mot malning. Protokollet är lämpligt för däggdjurs-, jäst- och bakterieceller.

Video correlati

Read Article