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Probenvorbereitung und relative Quantifizierung mittels reduktiver Methylierung von Aminen für Peptidomik-Studien

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Biochimica

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Sample Preparation and Relative Quantitation using Reductive Methylation of Amines for Peptidomics Studies

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Probenvorbereitung und relative Quantifizierung mittels reduktiver Methylierung von Aminen für Peptidomik-Studien

DOI:

10.3791/62971-v

•

08:00 min

•

November 04, 2021

•

Claudia Neves Correa², Louise Oliveira Fiametti, Maria Eduarda Mazzi Esquinca, Leandro Mantovani de Castro²

¹Department of Biological and Environmental Sciences, Bioscience Institute,Sao Paulo State University (UNESP), ²Biodiversity of Coastal Environments Postgraduate Program, Bioscience Institute,Sao Paulo State University (UNESP)

Capitoli

00:04Introduction
00:44Peptide Extraction: Cell Culture
01:30Peptide Extraction: Animal Tissues
03:39Peptide Quantification with Fluorescamine
04:18Reductive Methylation of Amines Labeling
05:58Results: Determining Labelled Peptides Using Mass Spectroscopy
07:19Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Dieser Artikel beschreibt eine Probenvorbereitungsmethode, die auf Wärmeinaktivierung basiert, um endogene Peptide zu erhalten und den Abbau post mortem zu vermeiden, gefolgt von einer relativen Quantifizierung mittels Isotopenmarkierung plus LC-MS.

Tags

Sample Preparation Relative Quantitation Reductive Methylation Amines Peptidomics Protease Inactivation Isotopic Labeling Neuroblastoma Cells Zebrafish Brain Cellular Lysate Ultrafiltration Solid-phase Extraction

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