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Rilevamento di epitopi sensibili alla neutralizzazione in antigeni visualizzati su vaccini basati su particelle simili a virus (VLP) utilizzando un test di cattura
JoVE Journal
Immunologia e infezioni
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JoVE Journal Immunologia e infezioni
Detection of Neutralization-sensitive Epitopes in Antigens Displayed on Virus-Like Particle (VLP)-Based Vaccines Using a Capture Assay
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Rilevamento di epitopi sensibili alla neutralizzazione in antigeni visualizzati su vaccini basati su particelle simili a virus (VLP) utilizzando un test di cattura

DOI:
10.3791/63137-v

•

05:15 min

•

February 10, 2022

•

, ,
1Research Group Pharmaceutical Biotechnology,TH Köln – University of Applied Sciences, 2Institute of Technical Chemistry,Leibniz University Hannover

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:52VLP Capture Assay
  • 03:15Results: Detection of Neutralization Epitopes in HIV-1 Envelope Glycoproteins Displayed on p55 Gag-Formed VLPs Using Broadly Neutralizing Antibodies
  • 04:28Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Qui, presentiamo un protocollo per rilevare epitopi di neutralizzazione su particelle simili a virus che visualizzano l'antigene (VLP). L'immunoprecipitazione dei VLP derivati dal virus dell'immunodeficienza umana (HIV) viene eseguita utilizzando anticorpi monoclonali specifici della glicoproteina dell'involucro accoppiati a perle magnetiche coniugate con proteina G. I VLP catturati vengono successivamente sottoposti all'analisi SDS-PAGE e Western blot utilizzando anticorpi specifici della proteina virale Gag.

Tags

Virus-like Particle (VLP)Neutralization-sensitive EpitopesCapture AssayBroadly-neutralizing Antibodies (bNABs)Quality AssessmentVaccine CandidatesMagnetic BeadsAntibody BindingWashing BufferSample Incubation

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