Rivista
/
Bioingegneria
/
Restspecifik udveksling af prolin ved hjælp af prolinanaloger i fluorescerende proteiner: Hvordan "molekylær kirurgi" af rygraden påvirker foldning og stabilitet
JoVE Journal
Bioingegneria
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioingegneria
Residue-Specific Exchange of Proline by Proline Analogs in Fluorescent Proteins: How “Molecular Surgery” of the Backbone Affects Folding and Stability

Restspecifik udveksling af prolin ved hjælp af prolinanaloger i fluorescerende proteiner: Hvordan "molekylær kirurgi" af rygraden påvirker foldning og stabilitet

DOI:
10.3791/63320-v

•

10:31 min

•

February 03, 2022

•

, , , ,
1Institute of Chemistry,Technische Universität Berlin, 2Department of Chemistry,University of Manitoba, 3Institute of Physics,Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 01:39Production of Recombinant Wild-Type Fluorescent Proteins and Selective Pressure Incorporation to Produce Fluorescent Proteins with Proline Analogs
  • 04:08Fluorescence Emission of Protein Variants
  • 05:00Denaturation and Refolding of EGFP Variants
  • 06:38Results: Effect of Atomic Substitutions in Variants of GFP
  • 09:17Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

For at overvinde begrænsningerne ved klassisk stedstyret mutagenese blev prolinanaloger med specifikke modifikationer inkorporeret i flere fluorescerende proteiner. Vi viser, hvordan udskiftningen af hydrogen med fluor eller af singlen med dobbeltbindinger i prolinrester ("molekylær kirurgi") påvirker grundlæggende proteinegenskaber, herunder deres foldning og interaktion med lys.

Tags

Keywords: Proline AnalogNon-canonical Amino AcidProtein FoldingProtein StabilityMolecular SurgeryFluorescent ProteinSite-directed MutagenesisRibosomal Protein TranslationProtein EngineeringE. Coli CultureNMM MediumOptical DensityCell SuspensionCentrifugationAmino Acid DepletionAmpicillin

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

check_url/it/63320?article_type=v

Thermodynamics of Membrane Protein Folding Measured by Fluorescence Spectroscopy
check_url/it/63320?article_type=v

Fluorescent Nanoparticles for the Measurement of Ion Concentration in Biological Systems
check_url/it/63320?article_type=v

Fabrication of Electrochemical-DNA Biosensors for the Reagentless Detection of Nucleic Acids, Proteins and Small Molecules
check_url/it/63320?article_type=v

Visualisere Proteiner og makromolekylære Komplekser af negative Stain EM: fra Grid Forberedelse til Image Acquisition
check_url/it/63320?article_type=v

Mikrofluidenheder Blandere til at studere proteinfoldning
check_url/it/63320?article_type=v

Kvantificering af Global diastolisk funktion ved Kinematisk Modeling-baseret analyse af Transmitral Flow via parametriserede diastolisk Filling Formalisme
check_url/it/63320?article_type=v

Levering af proteiner, peptider eller celleimpermeable små molekyler i levende celler ved inkubering med Endosomolytic Reagent dfTAT
check_url/it/63320?article_type=v

Fletning Ion Koncentration Polarisering mellem sidestillede ionbyttermembraner at blokere Forplantningen Polarisering Zone
check_url/it/63320?article_type=v

Produktion af gensplejsede gyldne syriske hamstere af Pronuclear injektion af CRISPR/Cas9-komplekset
check_url/it/63320?article_type=v

Bioprinting af brusk og huden væv analoger udnytter en roman passiv blanding enhed teknik for Bioink Precellularization

Read Article