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Quantificazione di specie reattive dell'ossigeno utilizzando la sonda di diacetato di 2′,7′-diclorofluoresceina e la citometria a flusso nelle cellule gliali di Müller
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Quantification of Reactive Oxygen Species Using 2′,7′-Dichlorofluorescein Diacetate Probe and Flow-Cytometry in Müller Glial Cells
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Quantificazione di specie reattive dell'ossigeno utilizzando la sonda di diacetato di 2′,7′-diclorofluoresceina e la citometria a flusso nelle cellule gliali di Müller

DOI:
10.3791/63337-v

•

14:25 min

•

May 13, 2022

•

, , , ,
1Departamento de Bioquímica Clínica, Facultad de Ciencias Químicas,Universidad Nacional de Córdoba, 2Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología (CIBICI),Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), 3Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra (INIMEC),Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET)

Capitoli

  • 00:00Introduction
  • 01:37Performing the Assay
  • 04:21Cells Preparaion for Flow Cytometry
  • 06:57Data Acquisition in a Flow Cytometer
  • 09:00Analysis of the Acquired Data
  • 12:07Representative Results
  • 13:37Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Qui, proponiamo un protocollo sistematizzato, accessibile e riproducibile per rilevare le specie reattive dell'ossigeno cellulare (ROS) utilizzando la sonda di diacetato 2′,7′-diclorofluoresceina (DCFH-DA) nelle cellule gliali di Müller (MMC). Questo metodo quantifica i livelli totali di ROS cellulare con un citometro a flusso. Questo protocollo è molto facile da usare, adatto e riproducibile.

Tags

Keywords: Reactive Oxygen SpeciesROS2′7′-dichlorofluorescein DiacetateDCFDAFlow CytometryOxidative StressCell MembraneEsterasesDichlorofluoresceinAntioxidantROS InducerDMEMPBSCentrifugationFACS Buffer

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