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ミュラーグリア細胞における2',7'-ジクロロフルオレセインジアセテートプローブとフローサイトメトリーを用いた活性酸素種の定量
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Quantification of Reactive Oxygen Species Using 2′,7′-Dichlorofluorescein Diacetate Probe and Flow-Cytometry in Müller Glial Cells
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ミュラーグリア細胞における2',7'-ジクロロフルオレセインジアセテートプローブとフローサイトメトリーを用いた活性酸素種の定量

DOI:
10.3791/63337-v

•

14:25 min

•

May 13, 2022

•

, , , ,
1Departamento de Bioquímica Clínica, Facultad de Ciencias Químicas,Universidad Nacional de Córdoba, 2Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología (CIBICI),Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), 3Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra (INIMEC),Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET)

Capitoli

  • 00:00Introduction
  • 01:37Performing the Assay
  • 04:21Cells Preparaion for Flow Cytometry
  • 06:57Data Acquisition in a Flow Cytometer
  • 09:00Analysis of the Acquired Data
  • 12:07Representative Results
  • 13:37Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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ここでは、ミュラーグリア細胞(MGC)中の2',7'-ジクロロフルオレセインジアセテートプローブ(DCFH-DA)を用いて細胞活性酸素種(ROS)を検出するための、体系化され、アクセス可能で再現可能なプロトコルを提案する。この方法は、フローサイトメーターを用いて全細胞ROSレベルを定量する。このプロトコルは非常に使いやすく、適切で再現性があります。

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Keywords: Reactive Oxygen SpeciesROS2′7′-dichlorofluorescein DiacetateDCFDAFlow CytometryOxidative StressCell MembraneEsterasesDichlorofluoresceinAntioxidantROS InducerDMEMPBSCentrifugationFACS Buffer

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