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Screening della libreria di shRNA in pool per identificare i fattori che modulano un fenotipo di resistenza ai farmaci
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Capitoli
- 00:00Introduction
- 00:24Selection of the Most Potent Promoter to Obtain Persistent and Prolonged Expression of the shRNAs
- 02:01Preparation of Pooled Lentiviral Human Epigenetic Factor shRNA Library
- 04:48Estimation of the Transduction Efficiency of Lentiviruses
- 06:03Transduction of Pooled Epigenetic shRNA Library in the Drug-Resistant Cell Line
- 07:20Enrichment of GFP Positive Cells
- 07:54Dropout Screening to Identify Epigenetic Factors Mediating Drug Resistance
- 09:20Amplification of the Integrated shRNAs by PCR
- 11:08Next-Generation Sequencing and Data Analysis
- 11:57Representative Results
- 14:30Conclusion
Lo screening dell'interferenza dell'RNA ad alto rendimento (RNAi) utilizzando un pool di shRNA lentivirali può essere uno strumento per rilevare bersagli letali sintetici terapeuticamente rilevanti nelle neoplasie maligne. Forniamo un approccio di screening dello shRNA aggregato per studiare gli effettori epigenetici nella leucemia mieloide acuta (LMA).
