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薬物耐性表現型を調節する因子を同定するためのプールされたshRNAライブラリースクリーニング
JoVE Journal
Ricerca sul cancro
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JoVE Journal Ricerca sul cancro
Pooled shRNA Library Screening to Identify Factors that Modulate a Drug Resistance Phenotype
DOI:

14:51 min

June 17, 2022

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Capitoli

  • 00:00Introduction
  • 00:24Selection of the Most Potent Promoter to Obtain Persistent and Prolonged Expression of the shRNAs
  • 02:01Preparation of Pooled Lentiviral Human Epigenetic Factor shRNA Library
  • 04:48Estimation of the Transduction Efficiency of Lentiviruses
  • 06:03Transduction of Pooled Epigenetic shRNA Library in the Drug-Resistant Cell Line
  • 07:20Enrichment of GFP Positive Cells
  • 07:54Dropout Screening to Identify Epigenetic Factors Mediating Drug Resistance
  • 09:20Amplification of the Integrated shRNAs by PCR
  • 11:08Next-Generation Sequencing and Data Analysis
  • 11:57Representative Results
  • 14:30Conclusion

Summary

Traduzione automatica

レンチウイルスshRNAのプールを用いたハイスループットRNA干渉(RNAi)スクリーニングは、悪性腫瘍における治療上重要な合成致死的標的を検出するためのツールとなり得る。我々は、急性骨髄性白血病(AML)におけるエピジェネティックなエフェクターを調査するために、プールされたshRNAスクリーニングアプローチを提供する。

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