Rivista
/
Neuroscienze
/
Celletypespecifik proteinrensning og identifikation fra komplekse væv ved hjælp af en mutant methionin tRNA-syntetasemuselinje
JoVE Journal
Neuroscienze
È necessario avere un abbonamento a JoVE per visualizzare questo.  Accedi o inizia la tua prova gratuita.
JoVE Journal Neuroscienze
Cell-Type Specific Protein Purification and Identification from Complex Tissues Using a Mutant Methionine tRNA Synthetase Mouse Line

Celletypespecifik proteinrensning og identifikation fra komplekse væv ved hjælp af en mutant methionin tRNA-syntetasemuselinje

DOI:
10.3791/63713-v

•

07:39 min

•

April 13, 2022

•

, , , , , ,
1Max-Planck-Institute for Brain Research,Synaptic Plasticity Department, 2Department of Biochemistry and Molecular Biology,Veterinary School, Complutense University of Madrid

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:40Tissue Harvesting, Lysis, and Protein Extraction
  • 03:03Protein Purification
  • 05:28Results: Cell-Type-Specific Protein Labeling with Azidonorleucine
  • 06:35Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Denne protokol beskriver, hvordan man udfører celletypespecifik proteinmærkning med azidonorleucin (ANL) ved hjælp af en muselinje, der udtrykker en mutant L274G-methionin tRNA-syntetase (MetRS *) og de nødvendige trin til mærkning af celletypespecifikke proteiner. Vi skitserer to mulige ANL-administrationsveje i levende mus ved (1) drikkevand og (2) intraperitoneale injektioner.

Tags

Cell-type SpecificProtein PurificationProtein IdentificationMutant Methionine TRNA SynthetaseCell Type Specific ProteinsIn VitroIn VivoImmunofluorescentAlkylationIodoacetamideBuffer ExchangeClick ChemistryAzidonorleucine IncorporationNeutravidin Binding

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

Preparation of Synaptoneurosomes from Mouse Cortex using a Discontinuous Percoll-Sucrose Density Gradient

Isolerende LacZ-udtrykkende celler fra mus indre øre Væv ved anvendelse af flowcytometri

Isolering og kvantificering af botulinumneurotoksin Fra komplekse matricer Brug af BoTest Matrix Analyser

Using Fluorescence Activated Cell Sorting to Examine Cell-Type-Specific Gene Expression in Rat Brain Tissue

Oprensning af musehjerne Fartøjer

Ekstern ekspression af neuroner ved hjælp af elektriske og magnetiske felter i en- og todimensionelle kulturer

Levende billeder af GLUT4 Protein handel med musen primære hypothalamus neuroner ved hjælp af Deconvolution mikroskopi

Hurtig og specifik Immunomagnetic Isolation af musen primære Oligodendrocytes

Kvantificere den heterogen fordeling af en Synaptic Protein i mus hjernen bruger immunfluorescens

Rensning af Prominin-1+ Stamceller fra Postnatal Mouse Cerebellum

Read Article