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Eine Spin-Tip-Anreicherungsstrategie zur simultanen Analyse von N-Glykopeptiden und Phosphopeptiden aus menschlichem Bauchspeicheldrüsengewebe
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A Spin-Tip Enrichment Strategy for Simultaneous Analysis of N-Glycopeptides and Phosphopeptides from Human Pancreatic Tissues
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Eine Spin-Tip-Anreicherungsstrategie zur simultanen Analyse von N-Glykopeptiden und Phosphopeptiden aus menschlichem Bauchspeicheldrüsengewebe

DOI:
10.3791/63735-v

•

09:16 min

•

May 04, 2022

•

, ,
1Department of Chemistry,University of Wisconsin-Madison, 2School of Pharmacy,University of Wisconsin-Madison

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 01:12Tissue Cryo-Pulverization, Lysis, Protein Extraction
  • 03:35Protein Digestion and Desalting
  • 05:36Dual-Functional Ti(IV) Simultaneous Enrichment
  • 07:19Results: Dual-Functional Ti(IV)-IMAC Enrichment and Mass Spectrometry Analysis of Protein N-Glycosylation and Phosphorylation in Pancreatic Tissues
  • 08:37Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Posttranslationale Modifikationen (PTMs) verändern Proteinstrukturen und -funktionen. Methoden zur gleichzeitigen Anreicherung mehrerer PTM-Typen können die Abdeckung in Analysen maximieren. Wir präsentieren ein Protokoll mit dual-funktioneller Ti(IV)-immobilisierter Metallaffinitätschromatographie, gefolgt von Massenspektrometrie zur gleichzeitigen Anreicherung und Analyse der Protein-N-Glykosylierung und Phosphorylierung in Pankreasgeweben.

Tags

Keywords: N-glycopeptidesPhosphopeptidesTitanium Immobilized Metal Affinity ChromatographyDual-functional EnrichmentSimultaneous AnalysisDisease Biomarker DiscoveryDiabetesCancerSpin TipsCentrifugationLysis BufferProtease InhibitorPhosphatase InhibitorSonicationMass Spectrometry Analysis

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