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Bottom-up In vitro Methoden zur Untersuchung der ultrastrukturellen Organisation, der Membranumformung und des Krümmungsempfindlichkeitsverhaltens von Septinen
JoVE Journal
Biologia
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JoVE Journal Biologia
Bottom-Up In Vitro Methods to Assay the Ultrastructural Organization, Membrane Reshaping, and Curvature Sensitivity Behavior of Septins
DOI:

09:09 min

August 17, 2022

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Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:49Designing Wavy NOA (Norland Optical Adhesive) Replica from Wavy PDMS (Polydimethylsiloxane) Patterns
  • 01:49Generation of a Supported Lipid Bilayer and Protein Incubation
  • 03:22Sample Fixation, Sample Dehydration, Critical Point Drying
  • 04:43Sample Mounting and Coating
  • 05:54Acquire the Images Using a Field-Emission SEM (FE-SEM) Microscope
  • 06:56Results: Analysis of the Self-Assembly of Septins at the Lipid Membrane
  • 08:27Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Septine sind Zytoskelettproteine. Sie interagieren mit Lipidmembranen und können Membrankrümmungen im Mikrometerbereich wahrnehmen, aber auch erzeugen. Wir beschreiben in diesem Protokoll Bottom-up-In-vitro-Methoden zur Analyse von Membranverformungen, krümmungsempfindlicher Septinbindung und Septinfilament-Ultrastruktur.

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