November 8th, 2006
אנו מתארים assay איכותי עבור הידבקות שמרים הפלישה אגר כאמצעי בידול פולשני pseudohyphal. Assay זה פשוט יכול לשמש כדי להעריך את פנוטיפ פולשני של מוטנטים שונים, כמו גם את ההשפעות רמזים סביבתיים איתות המסלולים על בידול שמרים.
קח 200 מיקרוליטר מתרבות העניין שלך ופשוט קבע מטרה. בדרך כלל אני יכול להתאים עד שש בצלחת בחודש אם אני רוצה, ואז אני עוזב, היא תיפתח ותן לה להתייבש. ואלה שתי צלחות.
באחד מהם יש עובש, אבל זה בסדר כי זה לא משפיע על הניסוי שלנו. ואחד מהם שלם, אחד מהם נמצא במדיום נמוך של גלוקוז. ולכן אנחנו הולכים להסתכל על הידבקות ופלישה ולראות אם יש הבדל.
אז פשוט תוציא את הצלחת ככה. ואתה יכול לראות דברים גדלים. אני הולך להתרחץ.
אתה יכול לראות את הבועות מתחת למקדחה, וזה בגלל שמים נכנסו מתחת למקדחה, וזה בסדר, אבל רק כדי שהמקדחה לא תחליק מהצלחת. אז הייתי אומר שלמרות שחלק מהתאים ירדו, שני הזנים האלה הם דביקים. התאים נצמדים לתאים אחרים שנצמדים אולי לאגר.
אחרת הרבה מהתאים היו מתנתקים והם לא. אז עכשיו, לאחר שתיעדנו הידבקות, אנחנו הולכים לתעד את הפלישה. אני הולך לשפשף את התאים מעל פני השטח בעדינות, עד כמה שהם יורדים.
אני לא מפעיל שום לחץ, אבל אני מנסה להשיג כל דבר שירד מהמשטח השני. ואתה תראה, אתה תרגיש שהאצבע שלך תתנגש במקום שבו הקריאה מנסה, אני מנסה לייבש אותה. האם אנחנו יכולים לראות את ההבדל כאן?
אתה לא יכול, וזה טוב כי זו צלחת שלמה ולכן הם לא רעבים לשום דבר. וזו צלחת נמוכה של גלוקוז והם רעבים לגלוקוז. אז אתה רואה את ההבדל.
אז זו שליטה טובה.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
מאמר זה מתאר מבחן איכותני להידבקות שמרים וחדירת אגר, אשר משמש כמדד לבידול חודרני ופסאודו-היפי. ניתן להשתמש במבחן כדי להעריך את הפנוטיפ החודרני של מוטציות שונות ואת ההשפעה של רמזים סביבתיים ומסלולי איתות על בידול השמרים.