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Charakterisierung des neuronalen Lysosomen-Interaktoms mit Proximity-Markierungsproteomik
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Capitoli
- 00:05Introduction
- 00:59Proximity Labeling in Human iPSC-Derived Neurons
- 03:17Enriching Biotinylated Proteins and On-Beads Digestion
- 06:39LC-MS Analysis
- 07:15Proteomics Data Analysis
- 08:36Results: Lysosome Proximity Labeling Proteomics Study Conducted in Human iPSC-Derived Neurons
- 10:43Conclusion
Ein neuronales Lysosomen-Proximity-Markierungs-Proteomik-Protokoll wird hier beschrieben, um die dynamische lysosomale Mikroumgebung in humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Neuronen zu charakterisieren. Lysosomale Membranproteine und Proteine, die mit Lysosomen interagieren (stabil oder vorübergehend), können in dieser Methode mit hervorragender intrazellulärer räumlicher Auflösung in lebenden menschlichen Neuronen genau quantifiziert werden.
