Detection of Homologous Recombination Intermediates via Proximity Ligation and Quantitative PCR in Saccharomyces cerevisiae

Diedre Reitz; J&#233;r&#244;me Savocco; Aur&#232;le Piazza; Wolf-Dietrich Heyer

doi:10.3791/64240

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Individuazione di intermedi di ricombinazione omologhi tramite legatura di prossimità e PCR quantitativa in Saccharomyces cerevisiae

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Detection of Homologous Recombination Intermediates via Proximity Ligation and Quantitative PCR in Saccharomyces cerevisiae

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Individuazione di intermedi di ricombinazione omologhi tramite legatura di prossimità e PCR quantitativa in Saccharomyces cerevisiae

DOI:

10.3791/64240-v

•

07:55 min

•

September 11, 2022

•

Diedre Reitz, Jérôme Savocco, Aurèle Piazza, Wolf-Dietrich Heyer³

¹Department of Microbiology & Molecular Genetics,University of California, Davis, ²Laboratory of Biology & Modeling of the Cell,École Normale Supérieure de Lyon, ³Department of Molecular & Cellular Biology,University of California, Davis

Capitoli

00:05Introduction
00:50DLC Assay
01:54Cell Spheroplasting, Lysis, and Restriction Site Restoration
03:19Restriction Enzyme Digest and Intramolecular Ligation
05:15Results: DLC and DLE Assay Analysis of D-Loops After DSB Induction
07:02Conclusion

Summary

Traduzione automatica

I saggi di acquisizione D-loop (DLC) e D-loop extension (DLE) utilizzano il principio della legatura di prossimità insieme alla PCR quantitativa per quantificare la formazione di D-loop, l'estensione del D-loop e la formazione del prodotto nel sito di una rottura inducibile a doppio filamento in Saccharomyces cerevisiae.

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