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Difusão e Montagem de Molécula Única em Membranas Lipídicas Repletas de Polímeros
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JoVE Journal Biochimica
Single-Molecule Diffusion and Assembly on Polymer-Crowded Lipid Membranes

Difusão e Montagem de Molécula Única em Membranas Lipídicas Repletas de Polímeros

DOI:
10.3791/64243-v

•

10:43 min

•

July 19, 2022

•

, , , , ,
1Department of Chemical Engineering,Indian Institute of Science, 2Holonyak Micro & Nanotechnology Lab,University of Illinois, Urbana-Champaign, 3Center for BioSystems Science and Engineering,Indian Institute of Science

Capitoli

  • 00:04Introduction
  • 00:53Assembly of the Microfluidic Chamber
  • 01:41Making Supported Bilayers on Glass Substrate by Vesicle Fusion
  • 04:22Microscope Setup and Single-Particle Imaging Measurements
  • 07:26Image Acquisition for Counting Subunits in a Protein Assembly
  • 08:40Results: Analyzing the Binding of Cytolysin A (ClyA) Protein and Mobility of DNA Tracer
  • 10:10Conclusion

Summary

Traduzione automatica

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Aqui, um protocolo para realizar e analisar a ligação, mobilidade e montagem de moléculas individuais em membranas lipídicas artificiais apinhadas usando microscopia de fluorescência de reflexão interna total de molécula única (smTIRF) é apresentado.

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Keywords: Single-molecule ImagingPolymer-crowded Lipid MembranesSupported Lipid BilayersMembrane Biomolecular ReactionsDiffusionAssemblyPOPCDOPE-PEG(2000)Small Unilamellar VesiclesSonicationMicrofluidic Imaging Chambers

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