Rivista
/
/
In Vitro Выбор инженерных транскрипционных репрессоров для таргетного эпигенетического подавления
JoVE Journal
Bioingegneria
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioingegneria
In Vitro Selection of Engineered Transcriptional Repressors for Targeted Epigenetic Silencing
DOI:

10:44 min

May 05, 2023

, , , , , , ,

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 01:34Engineering a Fluorescence-Based Reporter Cell Line
  • 03:10Designing gRNAs for CRISPR/dCas9-Based Epigenetic Silencing of Target Gene
  • 04:13Arrayed Transient Delivery of CRISPR/dCas9-Based ETRs in Reporter Cell Line
  • 07:19Analyzing Transcriptional Activity of Target Gene Over Time
  • 08:11Results: dCas9 ETR-Mediated Epigenetic Silencing of Human B2M Gene by gRNAs
  • 09:23Conclusion

Summary

Traduzione automatica

В данной работе мы представляем протокол отбора in vitro инженерных транскрипционных репрессоров (ETR) с высокой, долгосрочной, стабильной, целевой эффективностью подавления и низкой общегеномной внецелевой активностью. Этот рабочий процесс позволяет свести первоначальный сложный репертуар кандидатов ETR к короткому списку, пригодному для дальнейшей оценки в терапевтически значимых условиях.

Video correlati

Read Article