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Einfache und schnelle Rolling Circle Amplification-basierte Detektion der Topoisomerase 1-Aktivität in rohen biologischen Proben
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Capitoli
- 00:04Introduction
- 00:51Preparation of Functionalized Slides
- 01:34Generation of Closed Circular Substrates
- 02:16Blocking of the Wellmaker and Hybridization of the Circles
- 03:48Rolling Circle Amplification (RCA) and Visualization by Fluorescence Microscopy
- 05:54Coupling of HRP-Conjugated Antibody to Rolling Circle Products and Visualization
- 07:57Results: Detection of Topoisomerase 1 Activity Using the REEAD Assay
- 09:29Conclusion
Ein Protokoll für den sensitiven und quantitativen Nachweis der Topoisomerase 1-Aktivität unter Verwendung des Rolling-Circle-Enhanced Enzymaktivitätsnachweis-Assays wird beschrieben. Die Methode ermöglicht den Nachweis der Topoisomerase 1-Aktivität aus gereinigten Komponenten oder Zell-/Gewebeextrakten. Dieses Protokoll hat weitreichende Anwendungen in allen Bereichen, in denen enzymatische Aktivität nachgewiesen wird.
