Rivista
/
Biochimica
/
Enkeltmolekylebilleddannelse af lateral mobilitet og ionkanalaktivitet i lipiddobbeltlag ved hjælp af total intern refleksionsfluorescens (TIRF) mikroskopi
JoVE Journal
Biochimica
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochimica
Single-Molecule Imaging of Lateral Mobility and Ion Channel Activity in Lipid Bilayers using Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy

Enkeltmolekylebilleddannelse af lateral mobilitet og ionkanalaktivitet i lipiddobbeltlag ved hjælp af total intern refleksionsfluorescens (TIRF) mikroskopi

DOI:
10.3791/64970-v

•

08:55 min

•

February 17, 2023

•

,
1Biophysics Department, Institute of Biomaterials and Biomolecular Systems,University of Stuttgart

Capitoli

  • 00:05Introduction
  • 00:43Preparation of Lipids and Agarose Hydrogel
  • 01:33PMMA Chamber Assembly and Lipid Monolayer Formation
  • 03:06Preparation of Lipid-Coated Aqueous Droplets in Hexadecane/Silicone Oil Solution
  • 04:17Preparation and Imaging of Single Ion Channels in DIB Membranes
  • 06:49Results: Isolation of TOM-CC and Correlation of Channel Activity with Lateral Mobility of TOM-CC
  • 08:18Conclusion

Summary

Traduzione automatica

Traduzione automatica

Denne protokol beskriver, hvordan man bruger TIRF-mikroskopi til at spore individuelle ionkanaler og bestemme deres aktivitet i understøttede lipidmembraner og derved definere samspillet mellem lateral membranbevægelse og kanalfunktion. Den beskriver, hvordan man forbereder membranerne, registrerer dataene og analyserer resultaterne.

Tags

Keywords: Single-molecule ImagingLateral MobilityIon Channel ActivityLipid BilayersTotal Internal Reflection Fluorescence (TIRF) MicroscopyMembrane ProteinsDPhPCHexadecaneSilicone OilAgarose HydrogelPMMA Chamber

Article

Embed

AGGIUNGI ALLA PLAYLIST

Usage Statistics

Video correlati

check_url/it/64970?article_type=v

Vaskemiddel-fri ultrahurtig rekonstituering af membranproteiner i Lipid dobbeltlag ved hjælp af Fusogenic komplementære-ladet Proteoliposomes.
check_url/it/64970?article_type=v

In Vitro Rekonstituering af selvstændige organisering Protein mønstre på understøttede Lipid dobbeltlag
check_url/it/64970?article_type=v

Antistatiske Microgravimetry at studere bindende dynamikken i Phospholipid bindende Protein Annexin A2 til fast-understøttet Lipid dobbeltlag ved hjælp af et Quartz Resonator
check_url/it/64970?article_type=v

Proteinekspression og -oprensning af menneskelige Lipid-følsomme kation kanal TRPC3 for Strukturbestemmelse af enkelt-partikel kryo-elektronmikroskopi
check_url/it/64970?article_type=v

Enkelt-molekyle tracking mikroskopi-et værktøj til bestemmelse af Difvøse tilstande af Cytosolic molekyler
check_url/it/64970?article_type=v

Produktion af dynein og Kinesin motor ensembler på DNA origami nanostrukturer til observation af et enkelt molekyle
check_url/it/64970?article_type=v

Høj gennemløb total intern refleksion fluorescens og direkte stokastiske optisk genopbygning mikroskopi ved hjælp af en fotonisk chip
check_url/it/64970?article_type=v

Konventionelle BODIPY konjugatter til Live-Cell Super-Resolution mikroskopi og Single-Molecule Tracking
check_url/it/64970?article_type=v

Enkeltcelleanalyse af transskriptionsaktive alleler efter enkeltmolekyle FISH
check_url/it/64970?article_type=v

Enkeltmolekyle fluorescens energioverførsel undersøgelse af ribosom proteinsyntese

Read Article