I denne protokollen beskriver vi de tekniske prosedyrene for å generere brunt fettvev (BAT)-spesifikke knockoutmus som utnytter et kombinert Cre-LoxP, CRISPR-Cas9 og adenoassosiert virus (AAV) enkeltveis RNA (sgRNA) system. De beskrevne trinnene inkluderer utformingen av sgRNAene, fremstillingen av AAV-sgRNA-partiklene og mikroinjeksjon av AAV i BAT-.