Journal
/
/
Extrahera modifierade mikrotubuli från däggdjursceller för att studera mikrotubuli-proteinkomplex med kryoelektronmikroskopi
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
Extracting Modified Microtubules from Mammalian Cells to Study Microtubule-Protein Complexes by Cryo-Electron Microscopy
DOI:

08:02 min

March 03, 2023

, , ,

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:43Cell Culture and Harvesting
  • 01:30Microtubule Extraction
  • 04:13Cryo-Electron Microscopy (EM) Grid Preparation
  • 06:16Results: Analyzing Microtubule-Protein Complexes
  • 07:34Conclusion

Summary

Automatic Translation

Här beskriver vi ett protokoll för att extrahera endogent tubulin från däggdjursceller, som kan sakna eller innehålla specifika mikrotubulimodifierande enzymer, för att erhålla mikrotubuli anrikade för en specifik modifiering. Vi beskriver sedan hur de extraherade mikrotubuli kan dekoreras med renade mikrotubulibindande proteiner för att förbereda galler för kryoelektronmikroskopi.

Related Videos

Read Article