Name: דגימת נוזל מוחי ודם מווריד זנב לטרלי בחולדות במהלך רישומי EEG (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-01T13:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 46 s
Description: חקור שיטות דגימת נוזל מוחי ודם מווריד זנב בחולדות אפילפטיות במהלך רישומי EEG. טכניקות אלה מאפשרות זיהוי ביומרקרים לאבחון ופרוגנוזה של אפילפסיה בלי לגרום ללחץ מיותר בבעלי החיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נתמך על ידי מענק מתוכנית העבודה Horizon 2020 של האיחוד האירופי (התקשר H2020-FETOPEN-2018-2020) במסגרת הסכם מענק 964712 (PRIME; ל- M. Simonato).

נוזל מוחי ונסיגת דם מחולדות עם רישום EEG במקביל

<ol><li>Hanin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebrospinal+fluid+and+blood+biomarkers+of+status+epilepticus%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Cerebrospinal fluid and blood biomarkers of status epilepticus.</a> Epilepsia. 61 (1), 6-18 (2020).</li>
<li>Pitkänen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+development+of+biomarkers+for+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Neurology%22%5BJournal%5D)">Advances in the development of biomarkers for epilepsy.</a> The Lancet Neurology. 15 (8), 843-856 (2016).</li>
<li>Dlugos, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Childhood+Absence+Epilepsy+Study+Team+%282013%29.+Pretreatment+EEG+in+childhood+absence+epilepsy%3A+associations+with+attention+and+treatment+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Childhood Absence Epilepsy Study Team (2013). Pretreatment EEG in childhood absence epilepsy: associations with attention and treatment outcome.</a> Neurology. 81 (2), 150-156 (2013).</li>
<li>Lorenzo, N. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intractable+frontal+lobe+epilepsy%3A+pathological+and+MRI+features%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+research%22%5BJournal%5D)">Intractable frontal lobe epilepsy: pathological and MRI features.</a> Epilepsy research. 20 (2), 171-178 (1995).</li>
<li>van Dellen, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epilepsy+surgery+outcome+and+functional+network+alterations+in+longitudinal+MEG%3A+a+minimum+spanning+tree+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroImage%22%5BJournal%5D)">Epilepsy surgery outcome and functional network alterations in longitudinal MEG: a minimum spanning tree analysis.</a> NeuroImage. 86, 354-363 (2014).</li>
<li>Shah, A. K., Mittal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasive+electroencephalography+monitoring%3A+Indications+and+presurgical+planning%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Indian+Academy+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Invasive electroencephalography monitoring: Indications and presurgical planning.</a> Annals of Indian Academy of Neurology. 17 (Suppl 1), S89-S94 (2014).</li>
<li>Whiting, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+the+effectiveness+and+cost-effectiveness+of+neuroimaging+assessments+used+to+visualise+the+seizure+focus+in+people+with+refractory+epilepsy+being+considered+for+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Health+technology+assessment%22%5BJournal%5D)">A systematic review of the effectiveness and cost-effectiveness of neuroimaging assessments used to visualise the seizure focus in people with refractory epilepsy being considered for surgery.</a> Health technology assessment. 10 (4), 1-iv (2006).</li>
<li>Lenkov, D. N., Volnova, A. B., Pope, A. R., Tsytsarev, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advantages+and+limitations+of+brain+imaging+methods+in+the+research+of+absence+epilepsy+in+humans+and+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neuroscience+methods%22%5BJournal%5D)">Advantages and limitations of brain imaging methods in the research of absence epilepsy in humans and animal models.</a> Journal of neuroscience methods. 212 (2), 195-202 (2013).</li>
<li>Leach, J. P., Stephen, L. J., Salveta, C., Brodie, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Which+electroencephalography+%28EEG%29+for+epilepsy%3F+The+relative+usefulness+of+different+EEG+protocols+in+patients+with+possible+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neurology%2C+neurosurgery%2C+and++psychiatry%22%5BJournal%5D)">Which electroencephalography (EEG) for epilepsy? The relative usefulness of different EEG protocols in patients with possible epilepsy.</a> Journal of neurology, neurosurgery, and psychiatry. 77 (9), 1040-1042 (2006).</li>
<li>Huppertz, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+of+interictal+delta+and+epileptiform+EEG+activity+associated+with+focal+epileptogenic+brain+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroImage%22%5BJournal%5D)">Localization of interictal delta and epileptiform EEG activity associated with focal epileptogenic brain lesions.</a> NeuroImage. 13 (1), 15-28 (2001).</li>
<li>Linder, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+between+dried+blood+spot+and+plasma+sampling+for+therapeutic+drug+monitoring+of+antiepileptic+drugs+in+children+with+epilepsy%3A+A+step+towards+home+sampling%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+biochemistry%22%5BJournal%5D)">Comparison between dried blood spot and plasma sampling for therapeutic drug monitoring of antiepileptic drugs in children with epilepsy: A step towards home sampling.</a> Clinical biochemistry. 50 (7-8), 418-424 (2017).</li>
<li>Wegner, I., Wilhelm, A. J., Lambrechts, D. A., Sander, J. W., Lindhout, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+oral+contraceptives+on+lamotrigine+levels+depends+on+comedication%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+neurologica+Scandinavica%22%5BJournal%5D)">Effect of oral contraceptives on lamotrigine levels depends on comedication.</a> Acta neurologica Scandinavica. 129 (6), 393-398 (2014).</li>
<li>Palmio, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CSF+and+plasma+adipokines+after+tonic-clonic+seizures%5BTitle%5D)+AND+%22Seizure%22%5BJournal%5D)">CSF and plasma adipokines after tonic-clonic seizures.</a> Seizure. 39, 10-12 (2016).</li>
<li>Hogg, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevation+in+plasma+tRNA+fragments+precede+seizures+in+human+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Elevation in plasma tRNA fragments precede seizures in human epilepsy.</a> Journal of Clinical Investigation. 129 (7), 2946-2951 (2019).</li>
<li>Ellul, M., Solomon, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+encephalitis+-+diagnosis+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+medicine%22%5BJournal%5D)">Acute encephalitis - diagnosis and management.</a> Clinical medicine. 18 (2), 155-159 (2018).</li>
<li>Diamond, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-1%CE%B2+associations+with+posttraumatic+epilepsy+development%3A+a+genetics+and+biomarker+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">IL-1β associations with posttraumatic epilepsy development: a genetics and biomarker cohort study.</a> Epilepsia. 55 (7), 1109-1119 (2014).</li>
<li>Auvin, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prospective+clinical+trials+to+investigate+clinical+and+molecular+biomarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Prospective clinical trials to investigate clinical and molecular biomarkers.</a> Epilepsia. 58 (Suppl 3), 20-26 (2017).</li>
<li>Weber, Y. G., Nies, A. T., Schwab, M., Lerche, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+biomarkers+in+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Genetic biomarkers in epilepsy.</a> Neurotherapeutics. 11 (2), 324-333 (2014).</li>
<li>Fornari, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+stereotaxic+surgery+and+animal+welfare+outcome+improvements+for+behavioral+neuroscience%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Rodent stereotaxic surgery and animal welfare outcome improvements for behavioral neuroscience.</a> Journal of Visualized Experiments. (59), e3528(2012).</li>
<li>Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survivable+stereotaxic+surgery+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Survivable stereotaxic surgery in rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (20), e880(2008).</li>
<li>Gardiner, T. W., Toth, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotactic+Surgery+and+Long-Term+Maintenance+of+Cranial+Implants+in+Research+Animals%5BTitle%5D)+AND+%22Contemporary+Topics+in+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Stereotactic Surgery and Long-Term Maintenance of Cranial Implants in Research Animals.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 38 (1), 56-63 (1999).</li>
<li>Westergren, I., Johansson, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+physiological+parameters+of+rat+cerebrospinal+fluid+during+chronic+sampling%3A+evaluation+of+two+sampling+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Changes in physiological parameters of rat cerebrospinal fluid during chronic sampling: evaluation of two sampling methods.</a> Brain Research Bulletin. 27 (2), 283-286 (1991).</li>
<li>Soukupová, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impairment+of+GABA+release+in+the+hippocampus+at+the+time+of+the+first+spontaneous+seizure+in+the+pilocarpine+model+of+temporal+lobe+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Impairment of GABA release in the hippocampus at the time of the first spontaneous seizure in the pilocarpine model of temporal lobe epilepsy.</a> Experimental Neurology. 257, 39-49 (2014).</li>
<li>Soukupová, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+of+Excitatory+Amino+Acids+During+EEG+Recordings+in+Freely+Moving+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Microdialysis of Excitatory Amino Acids During EEG Recordings in Freely Moving Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (141), e58455(2018).</li>
<li>Guarino, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-dose+7%2C8-Dihydroxyflavone+Administration+After+Status+Epilepticus+Prevents+Epilepsy+Development%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Low-dose 7,8-Dihydroxyflavone Administration After Status Epilepticus Prevents Epilepsy Development.</a> Neurotherapeutics. 19 (6), 1951-1965 (2022).</li>
<li>Curia, G., Longo, D., Biagini, G., Jones, R. S. G., Avoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pilocarpine+model+of+temporal+lobe+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">The pilocarpine model of temporal lobe epilepsy.</a> Journal of Neuroscience Methods. 172 (2), 143-157 (2008).</li>
<li>Racine, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+seizure+activity+by+electrical+stimulation%3A+II.+Motor+seizure%5BTitle%5D)+AND+%22Electroencephalography+and+Clinical+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Modification of seizure activity by electrical stimulation: II. Motor seizure.</a> Electroencephalography and Clinical Neurophysiology. 32 (3), 281-294 (1972).</li>
<li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), e55852(2017).</li>
<li>Blood sampling: Rat. , https://nc3rs.org.uk/3rs-resources/blood-sampling/blood-sampling-rat (2022).</li>
<li>Powles-Glover, N., Kirk, S., Wilkinson, C., Robinson, S., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+toxicological+effects+of+blood+microsampling+in+the+vehicle+dosed+adult+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Regulatory+Toxicology+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Assessment of toxicological effects of blood microsampling in the vehicle dosed adult rat.</a> Regulatory Toxicology and Pharmacology. 68 (3), 325-331 (2014).</li>
<li>Zeller, W., Weber, H., Panoussis, B., Bürge, T., Bergmann, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refinement+of+blood+sampling+from+the+sublingual+vein+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animal%22%5BJournal%5D)">Refinement of blood sampling from the sublingual vein of rats.</a> Laboratory Animal. 32 (4), 369-376 (1998).</li>
<li>Wang, D., Zhao, Y., Yang, Y., Xie, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+assessment+of+multiple+repeated+percutaneous+punctures+for+the+collection+of+cerebrospinal+fluid+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Medical+and+Biological+Research%22%5BJournal%5D)">Safety assessment of multiple repeated percutaneous punctures for the collection of cerebrospinal fluid in rats.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 54 (6), e10032(2021).</li>
<li>Möller, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+repeated+kindled+seizures+on+heart+rate+rhythms%2C+heart+rate+variability%2C+and+locomotor+activity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Impact of repeated kindled seizures on heart rate rhythms, heart rate variability, and locomotor activity in rats.</a> Epilepsy & Behavior. 92, 36-44 (2019).</li>
<li>Espinosa-Garcia, C., Zeleke, H., Rojas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+Stress+on+Epilepsy%3A+Focus+on+Neuroinflammation-A+Mini+Review%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Impact of Stress on Epilepsy: Focus on Neuroinflammation-A Mini Review.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (8), 4061(2021).</li>
<li>Cassar, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparing+levels+of+biochemical+markers+in+CSF+from+cannulated+and+non-cannulated+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparing levels of biochemical markers in CSF from cannulated and non-cannulated rats.</a> Journal of Neuroscience Methods. 192 (2), 249-253 (2010).</li>
<li>Huang, Y. L., Säljö, A., Suneson, A., Hansson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+among+different+approaches+for+sampling+cerebrospinal+fluid+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Comparison among different approaches for sampling cerebrospinal fluid in rats.</a> Brain Research Bulletin. 41 (5), 273-279 (1996).</li>
<li>Hattori, N., Takumi, A., Saito, K., Saito, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+serial+cervical+or+tail+blood+sampling+on+toxicity+and+toxicokinetic+evaluation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Effects of serial cervical or tail blood sampling on toxicity and toxicokinetic evaluation in rats.</a> Journal of Toxicological Sciences. 45 (10), 599-609 (2020).</li>
<li>Roncon, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+profiles+in+hippocampal+granule+cells+and+plasma+of+rats+with+pilocarpine-induced+epilepsy--comparison+with+human+epileptic+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">MicroRNA profiles in hippocampal granule cells and plasma of rats with pilocarpine-induced epilepsy--comparison with human epileptic samples.</a> Scientific Reports. 5, 14143(2015).</li>
<li>van Vliet, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardization+procedure+for+plasma+biomarker+analysis+in+rat+models+of+epileptogenesis%3A+Focus+on+circulating+microRNAs%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Standardization procedure for plasma biomarker analysis in rat models of epileptogenesis: Focus on circulating microRNAs.</a> Epilepsia. 58 (12), 2013-2024 (2017).</li>
<li>Kirschner, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haemolysis+during+sample+preparation+alters+microRNA+content+of+plasma%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Haemolysis during sample preparation alters microRNA content of plasma.</a> PLoS One. 6 (9), e24145(2011).</li>
<li>Grimm, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advancing+the+3Rs%3A+innovation%2C+implementation%2C+ethics+and+society%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Veterinary+Science%22%5BJournal%5D)">Advancing the 3Rs: innovation, implementation, ethics and society.</a> Frontiers in Veterinary Science. 10, 1185706(2023).</li>
</ol>

למחברים אין מה לחשוף.

העבודה הנוכחית מדגימה טכניקה קלה לשליטה של CSF ואיסוף דם בחולדות, אשר עשויה להיות שימושית לא רק למחקרים במודלים של אפילפסיה אלא גם של מצבים נוירולוגיים אחרים או מחלות כגון אלצהיימר, פרקינסון או טרשת נפוצה. במחקר אפילפסיה, שני הליכי הדגימה יחד עם וידאו-EEG הם אידיאליים כאשר מחפשים מתאם בין רמות של מולקולות מסיסות שונות לבין פעילות ההתקפים. מסיבה ספציפית זו, נעשה שימוש בהקלטת וידאו-EEG רציפה: i) על מנת לאבחן נכון אפילפסיה או ii) כדי לעקוב אחר השלבים השונים של התקדמות המחלה, ו / או iii) כדי להתאים דגימה עם התרחשות של התקפים...

נוזל מוחי שדרתי (CSF) ודגימת דם חשובים לזיהוי ואימות סמנים ביולוגיים של אפילפסיה, הן במחקר פרה-קליני והן במחקר קליני 1,2. כיום, האבחנה של אפילפסיה ורוב המחקר על סמנים ביולוגיים של אפילפסיה מתמקדים ב- EEG והדמיה מוחית 3,4,5. גישות אלה, עם זאת, מציבות מספר מגבלות. מלבד מדידות שגרתיות בקרקפת, במקרים רבים, EEG דורש טכניקות פולשניות כמו אלקטרודות עומק6. שיטות הדמיה מוחית הן בעלות רזולוציה טמפורלית ומרחבית ירודה והן יקרות יחסית וגוזלות זמן 7,8. מסיבה זו, זיהוי סמנים ביולוגיים לא פולשניים, בעלות נמוכה ומבוססי נוזל ביולוגי יספק חלופה אטרקטיבית מאוד. בנוסף, סמנים ביולוגיים אלה של נוזל ביולוגי יכולים להיות משולבים עם גישות אבחון זמינות כדי לחדד את יכולת החיזוי שלהם.
חולים המאובחנים עם אפילפסיה נשלחים באופן שגרתי לדגימת EEG 9,10 ולדגימת דם 11,12,13,14, ורבים גם לנסיגה CSF כדי לשלול סיבות מסכנות חיים (כלומר, זיהומים חריפים, דלקת מוח אוטואימונית)15. דגימות דם ו- CSF אלה יכולות לשמש במחקר קליני שמטרתו לזהות סמנים ביולוגיים לאפילפסיה. לדוגמה, הוג ועמיתיו מצאו כי עלייה בשלושה מקטעי tRNA פלזמה קודמת להתרחשות התקף באפילפסיה אנושית14. באופן דומה, רמות אינטרלוקין-1beta (IL-1β) ב- CSF ובנסיוב אנושי, המבוטאות ביחס בין רמות IL-1β ב- CSF על פני סרום, יכולות לנבא התפתחות אפילפסיה פוסט-טראומטית לאחר פגיעה מוחית טראומטית16. מחקרים אלה מדגישים את החשיבות של דגימת נוזלים ביולוגיים למחקר סמנים ביולוגיים לאפילפסיה, אך הם מתמודדים עם מגבלות מרובות המהותיות לניסויים קליניים, למשל, הגורם המייסד של תרופות אנטי אפילפטיות (AEDs) בדם, היעדר תכוף של מידע אטיולוגי, בקרות לא מספקות, מספר צנוע של חולים, ואחרים17,18.
מחקר פרה-קליני מציע הזדמנויות אחרות לחקר מולקולות בנוזלים ביולוגיים כסמנים ביולוגיים פוטנציאליים לאפילפסיה. למעשה, ניתן למשוך פלזמה ו / או CSF מבעלי חיים בעת ביצוע הקלטות EEG. יתר על כן, ניתן לבצע דגימה שוב ושוב לאורך מספר ימים של הניסוי, וניתן להשתמש במספר בקרות תואמות גיל, מין ועלבון אפילפטי כדי לשפר את עמידות המחקר. כאן, טכניקה גמישה כדי לקבל CSF מ cisterna magna עם נסיגה מקבילה של פלזמה מן הווריד הזנב חולדות EEG מנוטר מתואר בפירוט. לטכניקה המוצגת מספר יתרונות על פני שיטות חלופיות. על ידי שימוש בגישת מחט פרפר, ניתן לאסוף CSF מספר פעמים מבלי לפגוע בתפקוד של אלקטרודות EEG או שתלי ראש דומים. זה מייצג שכלול של הליכי גמילה קטטר intrathecal, אשר קשורים עם סיכון גבוה יחסית של זיהום. בנוסף, גישת הנפילה החופשית המדווחת המשמשת לאיסוף דם עדיפה על גישות אחרות של נסיגת דם מווריד הזנב בגלל הסיכון המופחת ביותר להמוליזה, בשל העובדה שהדם אינו עובר דרך צינורות ולא מופעל לחץ ואקום. אם מבוצע בתנאים קפדניים ללא חיידקים, קיים סיכון נמוך במיוחד להדבקה עבור בעלי חיים. בנוסף, על ידי התחלת משיכת הדם ממש בקצה זנבות החיות, ניתן לחזור על הדגימה מספר פעמים. טכניקות כאלה קל לשלוט והוא יכול להיות מיושם במחקרים פרה-קליניים רבים של הפרעות במערכת העצבים המרכזית.

<table><tbody><tr><td>סט איסוף דם BD Vacutainer Safety-Lok</td><td>BD איטליה SpA, מילאנו, איטליה</td><td>367246</td><td>חומר</td></tr><tr><td>צינורות איסוף דם (Microtainer K2E)</td> <td>BD איטליה SpA, מילאנו, איטליה</td><td>365975</td><td>חומר</td></tr> סט <tr><td>עירוי כנפי פרפר 23G x 3/4 אינץ' 0.6 x 19 מ"מ</td><td>Nipro, אוסקה, יפן&nbsp;</td><td>PSY-23-ET-ICU</td><td>חומר</td></tr><tr><td>צנטריפוגה מקוררת ALC PK 130R</td><td>DJB Labcare Ltd, בקינגהאמשייר, אנגליה</td><td>112000033</td><td>חומר</td></tr><tr><td>תפר כותנה 3-0</td><td>Ethicon, Johnson & ג'ונסון טכנולוגיות כירורגיות, רריטאן, ניו ג'רזי, ארה"ב</td><td>7343H</td><td>חומר</td></tr><tr><td>דיאזפם 5 מ"ג/2 מ"ל, Solupam</td><td>Dechra מוצרים וטרינריים, טורינו, איטליה</td><td>105183014 (AIC)</td> <td>פתרון</td></tr><tr><td>וידאו דיגיטלי 8 ערוצים מערכת מקליט מדיה של טלמטריה EEG הוקמה Data</td><td>Sciences International (DSI), סנט פול, מינסוטה, ארה"ב</td><td>PNM-VIDEO-008</td><td>ציוד</td></tr><tr><td>מערכת מעקב וידאו דיגיטלית של EEG קשור</td><td>רשת EZVIZ, האנגג'ואו, סינה</td><td>EZVIZ (V5.3.2)</td> <td>חומר</td></tr><tr><td>חיטוי ציוד המבוסס על פרוקסידים מיוצבים ופעילות אמוניום רביעונית</td><td>מעבדת גרסין-בקטיניל, צרפת</td><td>LB 920111</td><td>פתרון</td></tr><tr><td>צינורית מדריך דמה 8 מ"מ</td><td>Agn Tho's, Lindig&ouml;, שוודיה</td><td>CXD-8</td><td>חומר</td></tr><tr><td>אלקטרודה 3 ערוצים דו-מעוותים</td><td>Invivo1, פלסטיק אחד, רואנוק, וירג'יניה, ארה"ב</td><td>MS333 / 3-B / SPC</td><td></td></tr><tr><td>חומר מחזיק אלקטרודה לניתוח סטריאוטקסי</td><td>Agn Tho's, Lindig&ouml;, שוודיה</td><td>1776-P1</td><td>ציוד</td></tr><tr><td>Eppendorf BioSpectrometer בסיסי</td><td>Eppendorf AG, המבורג, גרמניה</td><td>6137</td><td>ציוד</td></tr><tr><td> צינורות Eppendorf PCR 0.2 מ"ל</td><td>Eppendorf Srl, מילאנו, איטליה</td><td>30124332</td><td>חומר</td></tr><tr><td>Eppendorf &mu; Cuvette G1.0</td><td>Eppendorf AG, המבורג, גרמניה</td><td>6138</td><td>ציוד</td></tr><tr><td>מחט האכלה גמיש 17G לחולדה</td><td>Agn Tho's, Lindig&ouml; שוודיה</td><td>7206</td><td></td></tr><tr><td>חומר דשא טכנולוגיה מכשירים</td><td>Grass Technologies, Natus Neurology Incorporated, פלזנטון, קליפורניה, ארה"ב</td> ציוד <td>M665G08</td><td>(מגבר AS40, תיבת ראש, כבלים מחברים, דגם טלפקטור RPSA S40)</td></tr> <tr><td>איזופלורן 100%, IsoFlo</td><td>Zoetis, רומא, איטליה</td><td>103287025 (AIC)</td> <td>תמיסה</td></tr><tr><td>קטמין (Imalgene)</td> <td>מריאל, טולוז, צרפת</td><td>221300288 ( AIC)</td> <td>תמיסה</td></tr><tr><td>ליתיום כלוריד&nbsp;</td><td>סיגמא-אולדריץ', מילאנו, איטליה</td><td>L9650</td><td>חומר</td></tr><tr><td>צינורית מיקרו-הזרקה 31G 9 מ"מ</td><td>Agn Tho's, Lindig&ouml; שוודיה</td><td>CXMI-9</td><td>חומר</td></tr><tr><td>MP150 רכישת נתונים מודולריים ו&nbsp; מערכת ניתוח&nbsp;</td><td>ביופאק, גולטה, קליפורניה, ארה"ב</td><td>ציוד</td><td>MP150WSW</td></tr><tr><td>משחה וטרינרית עיניים, Hylo night</td><td>Ursapharm, מילאנו, איטליה</td><td>941791927 (AIC)</td> <td>חומר</td></tr><tr><td>Pilocarpine hydrochloride</td><td>Sigma-Aldrich, מילאנו, איטליה</td><td>P6503</td><td></td></tr><tr><td>חומר צינור PTFE עם מפרק</td><td>Agn Tho's, Lindig&ouml;, שוודיה</td><td>JT-10</td><td>חומר</td></tr><tr><td>מלח</td><td>0.9% NaCl, pH מותאם ל 7.0</td><td></td><td>תמיסה</td></tr><tr><td>סקופולמין הידרוברומיד טריהידראט</td><td>סיגמא-אולדריץ', מילאנו, איטליה</td><td>S2250</td><td>חומר</td></tr><tr><td>סקופולמין מתיל חנקתי</td><td>סיגמא-אולדריץ', מילאנו, איטליה</td><td>S1876</td><td>חומר</td></tr><tr><td>כסף&nbsp; סולפאדיאזין 1% קרם&nbsp;</td><td>Sofar, Trezzano Rosa, מילאנו, איטליה</td><td>025561010 (AIC)</td><td>חומר</td></tr><tr><td>סימפלקס מהיר צמנט מתאקרילי דנטלי&nbsp; &nbsp;</td><td>Kemdent, Associated Dental Products Ltd, סווינדון, בריטניה</td><td>ACR811</td><td></td></tr><tr><td>חומר מכשיר סטריאוטקסי</td><td>דיוויד קופף אינסטרומנטס, לוס אנג'לס, קליפורניה, ארה"ב</td><td>דגם 963</td><td>ציוד</td></tr><tr><td>תמיסת סוכרוז</td><td>10% סוכרוז במים מזוקקים</td> מזרק <td>תמיסה תוצרת בית</td><td></td></tr><tr><td>1 מ"ל&nbsp;</td><td>ביוסיגמה, קונה, ונציה, איטליה</td><td>20,71,26,03,00,350</td><td></td></tr><tr><td>טלמטר</td> חומרים <td>מדעי הנתונים הבינלאומי (DSI), סנט פול, מינסוטה, ארה"ב</td><td>CTA-F40</td><td></td></tr><tr><td>טלמטריית חומרים מנתח עקבות EEG</td><td>מדעי הנתונים הבינלאומי (DSI), סנט פול, מינסוטה, ארה"ב</td><td>NeuroScore v3-0</td><td></td></tr><tr><td>ציוד מערכת טלמטריה</td><td>מדעי הנתונים הבינלאומי (DSI), סנט פול, מינסוטה, ארה"ב</td><td>חומרה פלוס תוכנה Ponemah ליבה 6.51</td><td>ציוד</td></tr><tr><td>קסילזין הידרוכלוריד</td><td>סיגמא-אולדריץ', מילאנו, איטליה</td><td>X1251</td><td>חומר</td></tr></tbody></table>

דגימת נוזל מוחי ודם מווריד זנב לטרלי בחולדות במהלך רישומי eeg

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

מכיוון שהרכב נוזלי הגוף משקף דינמיקות פיזיולוגיות ופתולוגיות רבות, דגימות נוזל ביולוגיות מתקבלות בדרך כלל בהקשרים ניסיוניים רבים כדי למדוד מולקולות מעניינות, כגון הורמונים, גורמי גדילה, חלבונים או רנ"א קטנים שאינם מקודדים. דוגמה ספציפית היא דגימה של נוזלים ביולוגיים במחקר של סמנים ביולוגיים לאפילפסיה. במחקרים אלה, רצוי להשוות את רמות המולקולות בנוזל השדרה (CSF) ובפלזמה, על ידי משיכת CSF ופלזמה במקביל והתחשבות במרחק הזמן של הדגימה מהתקפים ואליהם. הדגימה המשולבת של CSF ופלזמה, יחד עם ניטור וידאו-EEG בבעלי חיים אפילפטיים, היא גישה מבטיחה לאימות של סמנים ביולוגיים אבחוניים ופרוגנוסטיים משוערים. כאן מתואר הליך של נסיגה משולבת של CSF מ- cisterna magna ודגימת דם מווריד הזנב הצידי בחולדות אפילפטיות המנוטרות באופן רציף באמצעות וידאו EEG. הליך זה מציע יתרונות משמעותיים על פני טכניקות נפוצות אחרות. הוא מאפשר דגימה מהירה עם מינימום כאב או פולשניות, וקיצור זמן ההרדמה. בנוסף, ניתן להשתמש בו כדי להשיג דגימות CSF ופלזמה הן בחולדות קשוחות והן בחולדות שנרשמו באמצעות טלמטריה, וניתן להשתמש בו שוב ושוב במשך מספר ימי ניסוי. על ידי מזעור הלחץ כתוצאה מהדגימה על ידי קיצור הרדמה איזופלורנית, המדדים צפויים לשקף בצורה מדויקת יותר את הרמות האמיתיות של מולקולות נחקרות בנוזלים ביולוגיים. בהתאם לזמינות של בדיקה אנליטית מתאימה, טכניקה זו עשויה לשמש למדידת רמות של מולקולות מרובות ושונות תוך ביצוע רישום EEG בו זמנית.

התוצאות של CSF שונים והליכי גמילה מדם שבוצעו ב -9 ביקורת ו -18 חולדות אפילפטיות, כולן מושתלות עם אלקטרודות חודש לאחר SE, מדווחת במונחים של שיעור הצלחה. לאחר ההשתלה, כל החולדות נוטרו באמצעות וידאו EEG במשך חודש אחד, שבמהלכו CSF בתוספת הדם הוצא 5x כל 3 ימים במהלך השבועיים האחרונים של הניסוי (כלומר, בימים 52, 55, 58, 61 ו-64 לאחר SE; dpSE). נתונים מנסיגות מרובות בבעלי חיים שונים שימשו להשוואת שיעור ההצלחה של איסוף CSF בחולדות בעלות ראש כפול שניחן בשתלים (מקופסאות שימורים למשיכת CSF) עם שיעור ההצלחה של איסוף CSF (שבוצע על יד...

הפרוטוקול מראה איסוף חוזר של נוזל המוח השדרה ודם מחולדות אפילפטיות, המבוצע במקביל לניטור וידאו-אלקטרואנצפלוגרם רציף (EEG). אלה חיוניים לחקר קשרים אפשריים בין שינויים במולקולות שונות של נוזל הגוף לבין פעילות התקפים.

דגימת נוזל מוחי ודם מווריד זנב לטרלי בחולדות במהלך רישומי EEG

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

במחקר שלנו, אנו שואפים למצוא סמנים ביולוגיים אבחוניים ופרוגנוסטיים לאפילפסיה. על מנת לאמת אותם בנוזלים ביולוגיים, אנו משווים את רמות החומרים הספציפיים בנוזל השדרה ובפלזמה עם התרחשות של התקפים ספונטניים בחולדות. כיום כמה חומצות ריבונוקלאיות קטנות שאינן מקודדות כמו miRNA או מקטעי tRNA זוהו כסמן ביולוגי במחזור לאפילפסיה, אך יש לאשר את יעילותן ככלי אבחון או פרוגנוסטיקה יעיל ואמין באפילפסיה.סמנים שונים לאפילפסיה, אנו מושכים באופן שגרתי פלזמה ו- CSF של חולדות אפילפטיות. בעת ביצוע הקלטת EEG, התלמידים מוצאים התקפים ספונטניים. כאשר אנו חוזרים על הדגימה על פני מספר ימים, אנו יכולים להתאים את רמות הסמנים עם התרחשות התקף יחיד או ההשפעה המצטברת שלהם.האתגר הנוכחי הוא להשיג כמות מספקת של דגימות באיכות גבוהה עבור ההליכים האנליטיים הבאים מבלי לגרום להתקפים מעוררי לחץ בבעלי חיים הנגרמים על ידי מניפולציה שלהם, אשר עלולים להפריע לרמות המולקולות הנחקרות. יש צורך רפואי דחוף שלא נענה לגלות סמנים ביולוגיים עבור אנשים עם אפילפסיה, במיוחד אלה פרוגנוסטיים ומסוכנים. דגימות פלזמה ו-CSF במקביל לניטור פרכוסי EEG מאפשרות התקדמות משמעותית למציאת הסמן המתאים.טכניקת גמילת הדם של וריד הזנב שלנו מייצרת דגימות פלזמה נטולות המוליזה באיכות גבוהה, מכיוון שהיא אינה דורשת ואקום או חליבת זנב. לניקוב Cisterna magna בו אנו משתמשים כדי לדגום CSF יש סטריליות טובה יותר וסיכון נמוך יותר לאובדן שתל ראש בהשוואה למערכת משומרת.

sampling-cerebrospinal-fluid-blood-from-lateral-tail-vein-rats-during

Research

JoVE Journal

Neuroscience

מדעי המוח

טראנסגנטי (TG) מודלים העכבר לספירה לספק הזדמנות מצוינת לחקור כיצד ומדוע רמות Aβ או טאו בשינוי CSF התקדמות המחלה בחולים אנושיים. כאן, אנו מדגימים מעודן צ'יסטרנה magna טכניקה לנקב הדגימה CSF סדרתי של העכבר.

טכניקה אוסף טורי של הנוזל השדרתי מן צ&#39;יסטרנה מגנה על עכבר

סרטון זה מדגים את ההליך להקלטות בו-זמניות של אלקטרואנצפלוגרפיה מקומית (EEG) ופוטנציאלי שדה מקומיים (LFPs) בחולדה מורדמת. התהליך כולל הכנת החולדה והצמדת אלקטרודות מעוררות לכריות השפם שלה. אלקטרודת עכביש EEG ממוקמת על גולגולת החולדה לצורך מדידות EEG על פני השטח. במקביל, מיקרואלקטרודה רב-ערוצית מוחדרת לאזור מסוים במוח דרך חור בגולגולת כדי לרשום פעילות עצבית מאזור מקומי במוח.

הקלטות פוטנציאליות אלקטרואנצפלוגרפיות ומקומיות בו-זמנית בחולדה מורדמת

סרטון זה מציג את הליכי ההכנה, ההקלטה וניתוח המקור של EEG ברזולוציה גבוהה על חולדות מורדמות עם מודל פרה-קליני מסוים של אפילפסיה מוקדית בתנאים לא פולשניים.

הדמיה מקור מוח במודלים פרה עכברוש של מיקוד אפילפסיה באמצעות רזולוציה גבוהה EEG הקלטות

דגימות דם שימושיות להערכת סמנים ביולוגיים של מצבים פיזיולוגיים או מחלה in vivo. כאן אנו מתארים את המתודולוגיה לדגימת דם מווריד הזנב הצדדי בחולדה. שיטה זו מספקת דגימות מהירות עם מינימום כאב ופולשניות.

דגימת דם מוריד הזנב לרוחב של העכברוש

פרוטוקול זה מתאר שיטה פשוטה עבור הקלטה בו זמנית של שותף מקומי אלקטרואנצפלוגרם (EEG) ו- multi-למינריות שדה מקומי פוטנציאל עכברוש anesthetized. חור burr בתלמידים הגולגולת עבור הכניסה של microelectrode מוצג לייצר עיוות זניח של האות EEG.

הקלטה בו זמנית של שותף מקומי אלקטרואנצפלוגרם ופוטנציאל שדה מקומי במכרסם

מחקר זה מציג שיטה עבור ההקלטה סימולטני של שדה מקומי פוטנציאל המוח, electrocardiograms, electromyograms, ונשימה אותות של חולדה נעה בחופשיות. טכניקה זו, אשר מפחית את עלויות ניסיוני ומפשטת את ניתוח הנתונים, יתרום להבנה של אינטראקציות בין המוח לבין איברים היקפיים בגוף.

הקלטות סימולטני של פוטנציאל קורטיקלית שדה מקומי, רל, Electromyogram נושם קצב מעכברוש נעה בחופשיות

כאן, אנו מתארים שיטה ויוו microdialysis לניתוח שחרור אספרטט ולא גלוטמט בהיפוקמפוס הגחון של חולדות אפילפסיה ואפילפטי, בשילוב עם הקלטות EEG. חוץ-תאית ריכוזי אספרטט גלוטמט יכול להיות בקורלציה עם השלבים השונים של המחלה.

Microdialysis של חומצות אמינו מעוררות במהלך ההקלטות EEG בחופשיות העברת חולדות

הפרוטוקול כאן מספק דגימה דינמית מפורטת בזמן אמת של נוזל חוץ-תאי מההיפוקמפוס של חולדות ערות באמצעות מערכת מיקרודיאליזה.

איסוף דינמי בזמן אמת של נוזל חוץ-תאי בהיפוקמפוס מחולדות מודעות באמצעות מערכת מיקרודיאליזה

שיטה לבידוד תאי גזע עצביים ותאי אב אוליגודנדרוציטים ממוחות של חולדות חיות מוצגת כאן בפירוט ניסיוני. הוא מאפשר אוספים מרובים של תאים אלה מאותם בעלי חיים מבלי לסכן את רווחתם.

שיטת "חליבת המוח" לבידוד תאי גזע עצביים ותאי אב אוליגודנדרוציטים מחולדות חיות

במאמר זה, אנחנו יכולים לתאר את הליך הניתוח והטיפול טיפים להשתלה של מערך polyimide מבוססי דקים microelectrode (PBM-array) בגולגולת עכבר לרכישת encephalography צפיפות גבוהה (EEG) במודל של עכברים.

בצפיפות גבוהה הקלטות EEG של העכברים לנוע בחופשיות באמצעות polyimide מבוססי microelectrode

חקור שיטות דגימת נוזל מוחי ודם מווריד זנב בחולדות אפילפטיות במהלך רישומי EEG. טכניקות אלה מאפשרות זיהוי ביומרקרים לאבחון ופרוגנוזה של אפילפסיה בלי לגרום ללחץ מיותר בבעלי החיים.

דגימת נוזל מוחי ודם מווריד זנב לטרלי בחולדות במהלך רישומי EEG

גלה סרטונים נוספים