Generation of Centromere-Associated Protein-E <em>CENP-E<sup>-/-</sup></em> Knockout Cell Lines using the CRISPR/Cas9 System

Meng-Fei Xu; Jie Chen; Yue Xu; Jing-Lian Zhang; Yi Zhou; Jie-Jie He; Shan Wu; Ya-Lan Wei; Zhen-Yu She

doi:10.3791/65476

Centromere-Associated Protein-E Gene Editing Using the CRISPR/Cas9 System

June 23, 2023

Generering av centromerassocierade protein-E CENP-E^-/- Knockout-cellinjer med hjälp av CRISPR/Cas9-systemet

02:19 min

•

Transfection, Isolation, and Screening of the CENP-E Knockout HeLa Cells

04:10 min

•

Immunofluorescence Staining and High-Resolution Confocal Microscopy of CRISPR/Cas9-Mediated CENP-E Knockout HeLa Cells

03:07 min

•

Chromosome Preparation and Karyotype Analysis of CRISPR/Cas9-Mediated CENP-E Knockout HeLa Cells

02:19 min

•

Meng-Fei Xu², Jie Chen², Yue Xu², Jing-Lian Zhang², Yi Zhou², Jie-Jie He², Shan Wu², Ya-Lan Wei⁴, Zhen-Yu She²

¹Department of Cell Biology and Genetics, The School of Basic Medical Sciences,Fujian Medical University, ²Key Laboratory of Stem Cell Engineering and Regenerative Medicine,Fujian Province University, ³College of Clinical Medicine for Obstetrics & Gynecology and Pediatrics,Fujian Medical University, ⁴Medical Research Center,Fujian Maternity and Child Health Hospital

Summary

Denna artikel rapporterar konstruktionen av centromer-associerade protein-E (CENP-E) knockout-celler med hjälp av CRISPR/Cas9-systemet och tre fenotypbaserade screeningstrategier. Vi har använt CENP-E knockout-cellinjen för att etablera ett nytt tillvägagångssätt för att validera CENP-E-hämmarnas specificitet och toxicitet, vilket är användbart för läkemedelsutveckling och biologisk forskning.