Une technique est présentée pour la collection in-vivo d'échantillons de liquide interstitiel des tissus à partir de sites pertinents (peau ici, expérimentalement enflammés) pour la mesure de médiation biochimiques douleur et l'inflammation.
Abstract
Ce bio-essai in vivo humaine peut être utilisée pour étudier des volontaires humains et des patients. Les échantillons sont prélevés à partir de sites pertinents, tels que les tissus de la peau via des cathéters insérés microdialyse aseptique (dialyse cutanée, Erlangen, Allemagne). Illustré dans cet exemple est la collection de liquide interstitiel de la peau enflammée expérimentalement chez des volontaires humains. Prélèvement d'échantillon peut être combiné avec d'autres tests expérimentaux. Par exemple, l'évaluation simultanée de produits biochimiques libérés localement et de la sensibilité subjective à un stimulus douloureux de la peau enflammée expérimentalement fournit l'essentiel biochimique et comportementale lien d'identifier des biomarqueurs de la douleur et l'inflammation. Présenté test dans l'organisme humain vivant permet de comprendre mécanistes dans les processus spécifiques de tissus sous-jacents des douleurs et / ou l'inflammation. La méthode est également bien adapté pour examiner l'efficacité des interventions existantes ou nouvelles – telles que de nouveaux candidats médicaments – ciblant le traitement des affections douloureuses et / ou inflammatoire. Cet article propose une description détaillée sur l'utilisation des techniques de microdialyse pour recueillir le liquide interstitiel lésion cutanée expérimentale enflammées des sujets de l'étude humaine. Les échantillons de liquide interstitiel sont généralement traitées avec l'aide de tests immunologiques multiplexe array billes permettant titrant jusqu'à 100 analytes dans des échantillons de faible volume de 50 microlitres.
Protocol
L'induction de l'inflammation expérimentale: Un coup de soleil au premier degré est induite chez les non-tanné la peau d'une cuisse avec l'aide d'un étalonnage, source de rayons ultraviolets B (Saalmann Multitester CFF LT 499, Saalmann GmbH, Hereford, Allemagne). Le coup de soleil est induite 24 heures avant de commencer une expérience microdialyse en appliquant trois fois la quantité de rayons UVB nécessaire pour causer des rougeurs complète de la peau exposée, ou trois fois la d…
Discussion
L'utilisation combinée des techniques de microdialyse et la technologie immuno multiplex est un précieux temps réel, in vivo bioessai humaine offrant un aperçu des événements biochimiques dans les tissus d'intérêt. Combiné avec des tests comportementaux tels que tests de douleur, la méthode permet d'étudier les interactions complexes des produits biochimiques médiation douleur et l'inflammation. La méthode est prometteuse pour 1) l'identification de biomarqueurs spécifiques de tissu médiation douleur et l&…
Angst, M. S., Tingle, M., Schmelz, M., Carvalho, B., Yeomans, D. C. Human In-Vivo Bioassay for the Tissue-Specific Measurement of Nociceptive and Inflammatory Mediators. J. Vis. Exp. (22), e1074, doi:10.3791/1074 (2008).