Micro-drive array per la cronica In vivo: Drive Fabrication
Summary
In questo protocollo dimostriamo come fabbricare un micro-drive array per registrazioni elettrofisiologiche cronica nei ratti.
Abstract
Registrazione cronica di grandi popolazioni di neuroni è una tecnica utile per studiare la funzione dei circuiti neuronali in ratti svegli comportarsi. Dispositivi di registrazione leggero portando una serie ad alta densità di tetrodi consentire il monitoraggio simultaneo dell'attività di decine o centinaia di singoli neuroni. Qui si descrive un protocollo per la realizzazione di un micro-drive array con 21 indipendentemente mobile micro-unità. Questo dispositivo è stato usato con successo per registrare da neuroni corticali e dell'ippocampo nel nostro laboratorio. Mostriamo come preparare un costume disegnato, 3-D di base stampata in plastica che si terrà il micro-drive. Dimostriamo come costruire le singole micro-unità e come assemblare l'intero micro-drive array. Ulteriore preparazione del array di unità per l'impianto chirurgico, come ad esempio la fabbricazione di tetrodi, carico di tetrodi in array di unità e di doratura, è coperto in un articolo il video successivo.
Protocol
Discussion
Questo protocollo descrive le caratteristiche generali del micro-drive processo di costruzione. E 'stato modificato con successo per la produzione di array di unità di registrazione con obiettivi più o meno gli array per le registrazioni nei topi. Oltre a registrare dalla ippocampo, molti ricercatori utilizzano queste unità per indirizzare le strutture corticali e sub-corticali. L'uso di viti più lunghe può essere richiesto al fine di registrare da strutture cerebrali profonde. Con una sostanziale modifica …
Acknowledgements
Vorremmo ringraziare Linus D. Sun e Jeenah Jung, che ha avuto origine l'uso del computer progettato, 3-D unità stampato nel nostro laboratorio per la registrazione da topi. Inoltre, vorremmo ringraziare tutti i membri passati e presenti Lab Wilson per il loro contributo a micro-drive e la tecnologia di sviluppo tetrodo in laboratorio.
Materials
| 3D-printed plastic parts | Material | American Precision Prototyping (www.approto.com) | Parts are printed by stereolithography (SLA) using DSM 14120 ‘ABS-like’, DSM 11120 ‘Watershed’ or Accura 55 resins. Request high resolution, no sandblasting. | |
| stainless steel tubing | Material | Small Parts (www.smallparts.com) | Cut to custom length and deburred. Sizes: 13 Ga (1pc @ 10 mm), 15 Ga (1pc @ 50 mm), 20 Ga thin wall (21pcs @ 5 mm), 23 Ga (21pcs @ 14 mm) | |
| Dental cement powder | Material | A-M Systems (www.a-msystems.com) | 525000 | |
| Dental cement solvent | Material | A-M Systems | 526000 | |
| Electrode interface board | Material | Neuralynx (www.neuralynx.com) | EIB-81 | |
| micro-drive screws | Material | Advanced Machining and Tooling (www.amtmfg.com) | Custom made screws with M1.2×0.25 threads (1.2mm major diameter; 0.25 mm thread pitch) | |
| ‘Tap-Ease’ tapping lubricant | Tool | AGS Company | TA-2 | Available from MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) |
| Polyimide tubing | Material | IWG High Performance Conductors (www.iwghpc.com) | Sizes: 30 Ga (outer diam: 0.0071″, inner diam: 0.0116″) 5 mil (nominal outer diam: 0.0055″, wall: 0.0010″) | |
| Cordless drill/driver | Tool | DeWalt (www.dewalt.com) | DC750KA | Any drill/driver with low-speed setting will do. |
| Variable-Speed Rotary Tool Kit with Flex-Shaft | Tool | Dremel (www.dremel.com) | 3956-02 | |
| Razor blades | Tool | VWR (www.vwr.com) | 55411-050 | |
| Watch glass | Tool | VWR | 66112-107 | |
| Tap for custom screws | Tool | Balax | 01302 | M1.2×0.25 Thredfloer thread-forming tap. Available from MSC Industrial Supply. |
| Taps | Tool | Small Parts | HSBT-0172, HSBT-0080 | 1-72, 0-80 bottoming taps |
| Pin vise | Tool | Vargus | 3SHC1–I | To hold taps. Available from MSC Industrial Supply |
| Drill bits | Tool | Small Parts | Sizes: 65, 61, 1.55mm | |
| Benchtop vise | Tool | Panavise | 301 | Available from DigiKey (www.digikey.com). |
| No.2 Dumont forceps | Tool | Stoelting (www.stoeltingco.com) | 52100-27 | Used for inserting 20 Ga thin wall sleeves. |
| 5-minute epoxy | Tool | Allied Electronics (www.alliedelec.com) | ||
| Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven (www.aveninc.com) | 18768 (Pattern 304) | Used for handling polyimide tubing. |
| Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments (www.biomedinstr.com) | 25-1000 | Used for cutting polyimide carrier tubes |
| Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark | 96F8903 | Used for handling stainless steel tubing and for construction of custom screwdriver. |
| mini pin vise | Tool | MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) | 00920314 | Used as a handle for custom made screwdriver. |
References
- Yamamoto, J., Wilson, M. A. Large-scale chronically implantable precision motorized microdrive array for freely behaving animals. J. Neurophysiol. 100 (4), 2430-2440 (2008).
