Micro-drive array per la cronica In vivo: tetrodo Assemblea
Summary
In questo protocollo dimostriamo come fabbricare e tetrodi condizione per l'utilizzo con un micro-drive array, che è stato progettato per registrazioni elettrofisiologiche cronica nei ratti. Inoltre, illustrare le fasi finali della costruzione di micro-drive array, che include l'installazione di cavi di terra e un cono protettivo.
Abstract
Il tetrodo, un fascio di quattro elettrodi, ha dimostrato di essere un prezioso strumento per la registrazione simultanea di più neuroni in vivo. L'ampiezza differenziale di firme del potenziale d'azione sui canali di un tetrodo permette l'isolamento di singole unità di attività da più unità segnali. La capacità di controllare con precisione la posizione stereotassica e la profondità della tetrodo è fondamentale per lo studio coordinato l'attività neurale in tutte le regioni del cervello. In combinazione con un micro-drive array, è possibile ottenere il posizionamento preciso e un controllo stabile di tetrodi molti nel corso di giorni o settimane. In questo protocollo, dimostriamo come fabbricare e tetrodi condizione utilizzando strumenti e materiali di base, installare il tetrodi in un multi-drive array tetrodo per la cronica in-vivo di registrazione nel ratto, le connessioni filo di terra al micro-drive array, e allegare un cono protettivo sulla serie di micro-drive per proteggere i tetrodi dal contatto fisico con l'ambiente.
Protocol
Discussion
Questo protocollo è la seconda rata di un protocollo in due parti: "Micro-drive array per cronica in vivo di registrazione." La combinazione di array di micro-drive e tetrodo è un potente strumento per l'ottenimento di registrazioni simultanee di molti neuroni in una veglia, comportarsi preparazione animali. Speriamo di aver fornito tutte le informazioni necessarie per voi sarà necessario iniziare o migliorare le registrazioni elettrofisiologiche nel proprio laboratorio.
Il …
Acknowledgements
Vorremmo riconoscere giugno Yamamoto per il suo design e la costruzione del automatico, dispositivo motorizzato tetrodo tornado rappresentato nel video. Inoltre, vorremmo ringraziare tutti i membri passati e presenti Lab Wilson per il loro contributo a micro-drive e la tecnologia di sviluppo tetrodo in laboratorio.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Panavise | Tool | Panavise | Model 301 | Holds either micro-drive array or serrated scissors |
| Modified Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark | 96F8903 | For inserting connector board pins. To make, remove 2mm from one tip of the pliers. |
| Slow Cure Glue | Material | Great Planes (Champaign, IL) | GPMR6015 | To glue the tetrode to the micro-drive |
| Gold Plating Solution | Material | Neuralynx | Sifco Selectron Gold NC | Contains gold particles for electroplating |
| Current Generator | Tool | World Precision Instruments | A365D-B | A.K.A. Stimulus Isolator. Used to electroplate gold solution onto electrode tips. |
| Impedance Meter | Tool | BAK Electronics | IMP-1 / 6662 / 2788 | To check impedance of electrodes |
| Hot Air Gun | Tool | Steinel (Germany) | HG 3002 LCD | To fuse electrodes together to make tetrode |
| Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven (Ann Arbor, MI) | 18768 (Pattern 304) | For handling tetrodes |
| Alligator Clip | Tool | Fine Science Tools | 18050-35 | A.K.A. Bulldog serrefine. To clip the tetrodes together during twisting |
| Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments | 25-1000 | For general cutting of tetrode/electrode wire |
| Iris Toughcut Serrated Scissors | Tool | Fine Science Tools | 14058-09 | For final cut of tetrodes |
| Teflon Coated Stainless Steel Wire | Material | A-M Systems (Carlsborg, WA) | 790500 | Ground wire |
| 12.5 micron nichrome wire | Material | Kanthal Palm Coast | Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING | Polyimide coated micro-wire for making tetrodes. |
| Tetrode Twister | Tool | Neuralynx | Tetrode Assembly Station | Increases the speed and consistency of tetrode fabrication. |
| Silver Paint | Material | GC Electronics | 22-023 | For connecting the micro-electrode wires of the tetrode to the connector pins (see Discussion) |
| X-Acto Knife Handle | Material | MSC Direct | X3001 | For constructing a micro-drive holding device. |
| 26 Pin, 2 Row Connector | Material | Mill-max | 852-10-026-30-001000 | For constructing a micro-drive holding device. |
References
- Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex. J. Neurosci. Methods. 63 (1-2), 43-54 (1995).
