ड्रोसोफिला लारवल NMJ immunohistochemistry
Summary
इस प्रोटोकॉल को दर्शाता है कैसे dissected ड्रोसोफिला लार्वा पर immunohistochemistry प्रदर्शन करने के लिए.
Abstract
<em> ड्रोसोफिला</em> Neuromuscular जंक्शन (NMJ) एक स्थापित मॉडल synaptic विकास और plasticity के अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया प्रणाली है. के व्यापक उपयोग<em> ड्रोसोफिला</em> मोटर प्रणाली अपने उच्च पहुँच के लिए कारण है. यह एकल कोशिका संकल्प के साथ विश्लेषण किया जा सकता है. Hemisegment 30 प्रति मांसपेशियों जिनकी व्यवस्था परिधीय शरीर दीवार के भीतर जाना जाता है. कुल 31 मोटर न्यूरॉन्स के एक पैटर्न है कि उच्च विश्वस्तता में इन मांसपेशियों को देते हैं. आणविक जीव विज्ञान और आनुवंशिकी का प्रयोग, एक ट्रांसजेनिक जानवरों या म्यूटेंट बना सकते हैं. फिर, एक NMJ की आकारिकी और समारोह पर विकास परिणाम का अध्ययन कर सकते हैं. Immunohistochemistry स्पष्ट रूप से NMJ की छवि घटकों के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इस अनुच्छेद में, हम कैसे एंटीबॉडी धुंधला उपयोग करने के लिए कल्पना का प्रदर्शन<em> ड्रोसोफिला</em> लार्वा NMJ.
Protocol
Discussion
Immunohistochemistry (आईएचसी) NMJ जीव विज्ञान के अध्ययन के लिए महत्वपूर्ण है क्योंकि यह NMJ के दृश्य सक्षम बनाता है. इस एंटीबॉडी कि neuronal झिल्ली (जैसे, एचआरपी), (उदाहरण के लिए, CSP, SYT) presynapse, और / या (जैसे, DLG) postsynapse पहचान का उपयोग करके पू?…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereomicroscope “Stemi” 2000 | Carl Zeiss MicroImaging Inc. | 495101-9804-000 | ||
| Light Source KL 1500 LCD | Carl Zeiss MicroImaging Inc. | 000000-1063-181 | ||
| Dumont SS Forceps | Fine Science Tools Inc. | 11200-33 | ||
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools Inc. | 11252-20 | ||
| Adams™ Nutator Mixer | Becton, Dickinson and Company | 421105 | ||
| No.1 Precision knife | X-Acto | 3201 | ||
| No. 16 Blades | X-Acto | 216 | ||
| ProLong Gold Antifade reagent | Invitrogen Corporation | 36930 |
References
- Jan, L. Y., Jan, Y. N. Properties of the larval neuromuscular junction in Drosophila Melanogaster. J. Physiol. 262, 189-214 (1976).
- Johansen, J., Halpern, M. E., Johansen, K. M., Keshishian, H. Stereotypic morphology of glutamatergic synapses on identified muscle cells of Drosophila larvae. J Neurosci. 9, 710-725 (1989).
- Kesheshian, H., Broadie, K., Chiba, A., Bate, M. The Drosophila neuromuscular junction: a model system for studying synaptic development and function. Annu Rev Neurosci. 19, 545-575 (1996).
- Collins, C. A., DiAntonio, A. Synaptic development: insights from Drosophila. Curr Opin Neurobiol. 17 (1), 35-42 (2007).
