कैंसर बोरेलिस Stomatogastric तंत्रिका प्रणाली विच्छेदन
Summary
योना केकड़ा के stomatogastric तंत्रिका प्रणाली (STNS) (<em> सी. बोरेलिस</em>) इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी, immunohistochemistry, और सेल संस्कृति के अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. STNS निष्कर्षण दो भागों में किया है: सकल और ठीक विच्छेदन.
Abstract
stomatogastric नाड़ीग्रन्थि (STG) और सेलुलर नेटवर्क बातचीत के अध्ययन के लिए एक शानदार मॉडल है क्योंकि यह कोशिकाओं की एक अपेक्षाकृत छोटी संख्या (लगभग 25 सी. बोरेलिस में), जो अच्छी तरह से विशेषता है शामिल है. STG में कोशिकाओं outputs के एक व्यापक रेंज प्रदर्शन और पेट की मोटर कार्यों के लिए जिम्मेदार हैं. पेट गैस्ट्रिक मिल जो नीचे तीन आंतरिक दांत के साथ खाना है, और जठरनिर्गम जो भोजन फिल्टर से पहले यह midgut तक पहुँचता टूट जाता है शामिल हैं. STG दो लयबद्ध गैस्ट्रिक मिल और केंद्रीय पैटर्न जनरेटर (CPGs) के रूप में जाना जाता जठरनिर्गम नियंत्रण outputs के उत्पादन करता है. STG में प्रत्येक कोशिका एक या इन लय के दोनों में भाग ले सकते हैं. ये CPGs neuromodulation, homeostasis के अध्ययन, सेलुलर नेटवर्क और परिवर्तनशीलता, नेटवर्क के विकास, और नेटवर्क वसूली के लिए अनुमति देते हैं.
योना केकड़ा (कैंसर बोरेलिस) से stomatogastric तंत्रिका तंत्र (STNS) के विच्छेदन के दो भागों में किया जाता है, सकल और ठीक विच्छेदन. सकल विच्छेदन में पूरे पेट केकड़ा से dissected है. ठीक विच्छेदन के दौरान STNS विच्छेदन खुर्दबीन और सूक्ष्म विच्छेदन उपकरण (1 आंकड़ा देखें) का उपयोग कर पेट से निकाला जाता है. STNS STG, oesophageal नाड़ीग्रन्थि (ओग), और commissural (दांता) ganglia के रूप में के रूप में अच्छी तरह से नसों है कि पेट की मांसपेशियों अंदर आना भी शामिल है. यहाँ, हम बताते हैं कैसे जहां STG में कोशिकाओं intracellularly और परिधीय नसों से दर्ज होगा एक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी प्रयोग के लिए तैयार करने में STNS की एक पूरी विच्छेदन प्रदर्शन करने के लिए बाह्य रिकॉर्डिंग के लिए इस्तेमाल किया जाएगा. वांछित नसों को खोजने के लिए उचित तकनीक के रूप में अच्छी तरह से नाड़ीग्रन्थि desheathing somata और neuropil प्रकट की हमारी तकनीक के रूप में दिखाया गया है.
Protocol
Discussion
STNS विच्छेदन एक इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी या immunohistochemistry प्रयोग, सेल संस्कृति के लिए कोशिकाओं को प्राप्त करने के लिए या प्रदर्शन में पहला कदम है. इरादा प्रयोग के बावजूद, सकल विच्छेदन अपरिवर्तित रहेगा. हालांकि, ठ?…
Acknowledgements
हम कृतज्ञता Marder लैब के सदस्यों को स्वीकार करते हैं. हम उसका समर्थन और प्रोत्साहन के लिए हमारे सलाहकार, डॉ. ईव Marder, धन्यवाद. इस शोध में मस्तिष्क संबंधी विकार के राष्ट्रीय संस्थान और स्ट्रोक एन एस +१७,८१३ और एन एस – 058,110 अनुदान द्वारा समर्थित किया गया.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Black Sylgard 170 | 기타 | Dow Corning | 170 | Gross Dissection |
| Fine Scissors | Surgery | FST | 14090-09 | |
| Insect Pins size 6 | Surgery | FST | 26000-65 | |
| Mayo Scissors | Surgery | FST | 14110-17 | |
| Micro-Spatula | Surgery | Ward Sci. | 15 V 4313 | |
| Rongeurs | Surgery | FST | 16000-14 | |
| Tissue Forceps | Surgery | FST | 11021-12 | |
| Fine Tungsten Wire (0.001 in. diameter) | Surgery | California Fine Wire | Fine Dissection | |
| Forceps #5 | Surgery | FST | 91150-20 | |
| Minuten Pins | Surgery | FST | 26002-10 | |
| Moria Spring Scissors (7mm blades) | Surgery | FST | 15370-52 | |
| Petri Dish (100x15mm) | 기타 | Fischer | 08-757-12 | |
| Pin Holder | Surgery | FST | 26018-17 | |
| Super fine forceps #5SF | Surgery | FST | 11252-00 | |
| Sylgard 182 | 기타 | Dow Corning | 182 | |
| Tungsten Needles | Surgery | FST | 10130-05 | |
| Dissecting Microscope | Microscope | Wild | MC3 | Misc. |
| Jonah Crab (C. borealis) | Animal | Commercial Lobster |
References
- Harris-Warrick, R. M., Marder, E., Selverston, A. I., Moulins, M. . Dynamic Biological Networks: The stomatogastric nervous system. , (1992).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).
- Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268 (892), 161-220 (1974).
- Selverston, A. I., Russell, D. F., Miller, J. P. The Stomatogastric Nervous System: Structure and function of a small neural network. Prog. Neurobiology. 7, 215-290 (1976).
