Cáncer de Borealis Stomatogastric disección del sistema nervioso
Summary
El sistema nervioso stomatogastric (STNS) del cangrejo de Jonás (<em> C. boreal</em>) Se puede utilizar para electrofisiología, inmunohistoquímica y estudios en cultivos celulares. La extracción STNS se realiza en dos partes: la disección fina y gruesa.
Abstract
El ganglio stomatogastric (STG) es un excelente modelo para el estudio de las interacciones celulares y la red, ya que contiene un número relativamente pequeño de las células (aproximadamente 25 en C. borealis), que están bien caracterizados. Las células de la STG exhiben una amplia gama de productos y son responsables de las acciones motrices del estómago. El estómago contiene el molino gástrico, que descompone los alimentos con tres dientes internos, y el píloro, que filtra los alimentos antes de llegar al intestino. El STG produce dos salidas para controlar el ritmo del molino gástrico y el píloro conocido como generadores de patrones centrales (GPC). Cada celda de la STG se puede participar en uno o ambos de estos ritmos. Estas GPC permiten el estudio de la neuromodulación, la homeostasis, la variabilidad celular y de redes, desarrollo de redes, y la recuperación de la red.
La disección del sistema nervioso stomatogastric (STNS) del cangrejo de Jonás (cáncer borealis) se realiza en dos partes: la disección fina y gruesa. En la disección bruto de todo el estómago se diseca del cangrejo. Durante la disección fina del STNS se extrae del estómago usando un microscopio de disección y la disección de micro-herramientas (ver figura 1). El STNS incluye la STG, el ganglio esofágico (OG), y los ganglios de la comisura (COG), así como los nervios que inervan los músculos del estómago. Aquí, se muestra cómo realizar una disección completa de los STNS en la preparación de un experimento de electrofisiología en las células de la STG se registrará a partir de la célula y los nervios periféricos se utilizan para las grabaciones extracelular. La técnica adecuada para encontrar los nervios deseada se muestra, así como nuestra técnica de desheathing el ganglio para revelar la somata y neuropilo.
Protocol
Discussion
La disección STNS es el primer paso en la realización de un experimento de electrofisiología o inmunohistoquímica, o para la obtención de células para el cultivo celular. Independientemente del experimento previsto, la disección bruto se mantendrá sin cambios. Sin embargo, la disección fina puede variar. Es importante planificar de antemano que las células y los nervios que va a grabar desde. La mayoría de las neuronas en el STG tienen procesos que inervan al menos un músculo en el estómago (ver figura 2) y…
Acknowledgements
Queremos agradecer a los miembros del Laboratorio de Marder. Agradecemos a nuestro asesor, el Dr. Marder Eva, por su apoyo y aliento. Esta investigación fue financiada por el Instituto Nacional de Trastornos Neurológicos y Apoplejía Becas NS y NS-17813-058110.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Black Sylgard 170 | 기타 | Dow Corning | 170 | Gross Dissection |
| Fine Scissors | Surgery | FST | 14090-09 | |
| Insect Pins size 6 | Surgery | FST | 26000-65 | |
| Mayo Scissors | Surgery | FST | 14110-17 | |
| Micro-Spatula | Surgery | Ward Sci. | 15 V 4313 | |
| Rongeurs | Surgery | FST | 16000-14 | |
| Tissue Forceps | Surgery | FST | 11021-12 | |
| Fine Tungsten Wire (0.001 in. diameter) | Surgery | California Fine Wire | Fine Dissection | |
| Forceps #5 | Surgery | FST | 91150-20 | |
| Minuten Pins | Surgery | FST | 26002-10 | |
| Moria Spring Scissors (7mm blades) | Surgery | FST | 15370-52 | |
| Petri Dish (100x15mm) | 기타 | Fischer | 08-757-12 | |
| Pin Holder | Surgery | FST | 26018-17 | |
| Super fine forceps #5SF | Surgery | FST | 11252-00 | |
| Sylgard 182 | 기타 | Dow Corning | 182 | |
| Tungsten Needles | Surgery | FST | 10130-05 | |
| Dissecting Microscope | Microscope | Wild | MC3 | Misc. |
| Jonah Crab (C. borealis) | Animal | Commercial Lobster |
References
- Harris-Warrick, R. M., Marder, E., Selverston, A. I., Moulins, M. . Dynamic Biological Networks: The stomatogastric nervous system. , (1992).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).
- Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268 (892), 161-220 (1974).
- Selverston, A. I., Russell, D. F., Miller, J. P. The Stomatogastric Nervous System: Structure and function of a small neural network. Prog. Neurobiology. 7, 215-290 (1976).
