Summary

Kanser Borealis Stomatogastric Sinir Sistemi Diseksiyon

Published: March 23, 2009
doi:

Summary

Jonah yengeç stomatogastric sinir sistemi (STNS) (<em> C. poyraz</em> Elektrofizyoloji, immünhistokimya ve hücre kültürü çalışmaları için kullanılabilir). STNS çıkarma iki bölümden yapılır: kaba ve ince diseksiyon.

Abstract

Iyi karakterize bir hücre nispeten az sayıda (yaklaşık 25 C borealis) içerdiğinden stomatogastric ganglion (STG), hücresel ve ağ etkileşimleri çalışmak için mükemmel bir model . STG hücreler çıkışları geniş bir sergi ve mide motor eylemler için sorumludur. Mide, üç iç dişleri ile gıda ve gıda midgut ulaşmadan önce filtreler pyloru parçalayan gastrik değirmen içerir. STG merkezi desen jeneratörleri (CPG'lerin hepsi aynı) olarak bilinen mide değirmen ve pyloru kontrol etmek için iki ritmik çıkışları üretir. STG Her hücre bu ritimleri birini veya her ikisini katılabilir. Bu CPG'lerin nöromodülasyon çalışmada, homeostazı, hücresel ve ağ değişkenlik, ağ geliştirme ve ağ kurtarma için izin verir.

Jonah yengeç (Kanser borealis) stomatogastric sinir sistemi (STNS) diseksiyonu iki parça halinde yapılır; kaba ve ince diseksiyon. Brüt diseksiyon tüm mide yengeç disseke edilir. Ince diseksiyon sırasında STNS mide bir diseksiyon mikroskobu ve mikro diseksiyon araçları (bkz. Şekil 1) kullanılarak elde edilir. STNS STG, özofagus ganglion (RG) ve commissural ganglionlar (cog) yanı sıra mide kasları innerve sinirleri içerir. Burada, ekstrasellüler kayıtları için kullanılan olurdu STG hücrelerin intraselüler ve periferik sinirleri kaydedilen olacak bir elektrofizyoloji deney için hazırlık STNS tam bir diseksiyon nasıl göstermektedir. Somata ve neuropil ortaya çıkarmak için ganglion desheathing bizim teknik olarak istenilen sinirler bulmak için uygun tekniği de gösterilmiştir.

Protocol

1. Brüt Diseksiyon Hayvan donuk duyu ve motor sistemlerinin 30 dakika boyunca buz üzerinde bir yengeç yerleştirin. Buz ile her tarafta onu çevreleyen. Yengeç Kullanım sırasında eldiven giyilmelidir. Diseksiyonu pan ve kullanacağınız araçları dışarı atarken brüt diseksiyon için hazırlayın. Rongeurs, kemik kesme makası, küçük makas, dişli forseps, konik kenarı ile spatula, siyah Sylgard kaplı çanak, ve böcek pimleri ihtiyaç vardır. Sıkışmasını önlemek ve…

Discussion

STNS diseksiyonu bir elektrofizyoloji veya immünohistokimya deney, ya da hücre hücre kültürü elde etmek için yerine ilk adımdır. Amaçlanan deney ne olursa olsun, brüt diseksiyon değişmeden kalır. Ancak, ince diseksiyon değişebilir. Öncesinde kayıt hücreleri ve sinirler zaman planı için önemlidir. STG nöronların çoğu mide en az bir kas innerve (bkz. Şekil 2) ve innerve hedef göre sınıflandırılır süreçleri var. Bu nedenle, ekstraselüler kayıtları tam intraselüler kaydedilmiş olan bi…

Acknowledgements

Biz minnetle Marder Lab üyeleri kabul etmiş oluyorsunuz. Danışmanı Dr. Havva Marder, Biz ona destek ve cesaret için teşekkür ederim. Bu araştırma, Ulusal Nörolojik Bozukluklar ve İnme Hibeler NS-17.813 ve NS-058.110 Enstitüsü tarafından desteklenmiştir.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Black Sylgard 170 기타 Dow Corning 170 Gross Dissection
Fine Scissors Surgery FST 14090-09  
Insect Pins size 6 Surgery FST 26000-65  
Mayo Scissors Surgery FST 14110-17  
Micro-Spatula Surgery Ward Sci. 15 V 4313  
Rongeurs Surgery FST 16000-14  
Tissue Forceps Surgery FST 11021-12  
Fine Tungsten Wire (0.001 in. diameter) Surgery California Fine Wire   Fine Dissection
Forceps #5 Surgery FST 91150-20  
Minuten Pins Surgery FST 26002-10  
Moria Spring Scissors (7mm blades) Surgery FST 15370-52  
Petri Dish (100x15mm) 기타 Fischer 08-757-12  
Pin Holder Surgery FST 26018-17  
Super fine forceps #5SF Surgery FST 11252-00  
Sylgard 182 기타 Dow Corning 182  
Tungsten Needles Surgery FST 10130-05  
Dissecting Microscope Microscope Wild MC3 Misc.
Jonah Crab (C. borealis) Animal Commercial Lobster    

References

  1. Harris-Warrick, R. M., Marder, E., Selverston, A. I., Moulins, M. . Dynamic Biological Networks: The stomatogastric nervous system. , (1992).
  2. Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).
  3. Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268 (892), 161-220 (1974).
  4. Selverston, A. I., Russell, D. F., Miller, J. P. The Stomatogastric Nervous System: Structure and function of a small neural network. Prog. Neurobiology. 7, 215-290 (1976).
check_url/kr/1207?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Gutierrez, G. J., Grashow, R. G. Cancer Borealis Stomatogastric Nervous System Dissection. J. Vis. Exp. (25), e1207, doi:10.3791/1207 (2009).

View Video