Banca cerebro: Aprovechar al máximo las muestras de su investigación
Summary
Banca cerebro y el muestreo sistemático de la materia biológica constituye la base para estereología imparcial y maximiza el potencial de los datos obtenidos de cada ejemplar.
Abstract
Estereología imparcial es un método de forma precisa y eficiente la estimación del número de neuronas total (o otro tipo de células) en un área de interés<sup> 1</sup>. Para lograr este objetivo 60-10 secciones sistemática debe ser probado que cubre toda la estructura. Generalmente, esto implica el procesamiento 1.5 secciones que deja una importante cantidad de material sin procesar. Con el fin de maximizar el material, se propone un método barato para la preservación de tejido fijado como parte de un plan de almacenamiento a largo plazo de la investigación. Medida que el tejido se corta y se procesaron para la deseada mancha o anticuerpos, las secciones alternativas deberían ser sistemáticamente colocado en el antígeno conservar a -20 ° C para el procesamiento futuro. Utilizando placas de 24 pocillos, las secciones se pueden colocar en orden para su futura recuperación. Usando este método, el tejido puede ser almacenada y procesada por inmunohistoquímica en el transcurso de los años.
Protocol
Discussion
El muestreo sistemático es un método barato destinado a maximizar el material de investigación. Esta estrategia de muestreo se ha diseñado para cumplir con las normas de estereología imparcial que requiere un muestreo sistemático en toda la región. Es muy importante que el orden de las secciones de cada serie se mantiene. En nuestro laboratorio hemos utilizado con éxito este método para la banca de los hamster y no humanos, cortes de cerebro de los primates. Hasta ahora, hemos recogido cerca de 20.000 monos ver…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Los autores desean agradecer a Ikiel Ptito por su apoyo técnico continuo.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Ethylene glycol | Fisher | E178-4 | ||
| Polyvinyl pyrrolidone | Fisher | BP431-500 | ||
| Thermal Scientific Embedding Medium | Fisher |
References
- West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
- Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the Non-human Primate Brain in Stereotaxic Space. J Vis Exp. , (2009).
