De niet-menselijke primaat is een belangrijk translationeel soort voor ons begrip van de ontwikkeling en veroudering. De anatomische organisatie van het primaat netvlies kan leveren belangrijke inzichten in normale en pathologische omstandigheden bij de mens.
Abstract
Het visuele systeem bij de mens wordt beschouwd als de poort naar de wereld en speelt een belangrijke rol in de overvloed van zintuiglijke, perceptuele en cognitieve processen. Het is dan ook niet verwonderlijk dat de kwaliteit van het zicht is gebonden aan de kwaliteit van leven. Ondanks de wijdverspreide klinisch en fundamenteel onderzoek rond de oorzaken van visuele stoornissen, vele vormen van visuele beperkingen, zoals retinitis pigmentosa en maculaire degeneratie, gebrek aan effectieve behandelingen. Niet-menselijke primaten hebben het dichtst algemene kenmerken van het oog de ontwikkeling aan die van de mens. Niet alleen hebben ze een vergelijkbare vasculaire anatomie, maar onder andere zoogdieren, primaten hebben de unieke eigenschap van het hebben van een gebied in de temporale retina gespecialiseerd is voor een hoge gezichtsscherpte, de fovea<sup> 1</sup>. Hier beschrijven we een algemene techniek voor het ontleden van de retina om weefsel te bieden voor het netvlies histologie, immunohistochemie, laser capture microdissectie, evenals licht-en elektronenmicroscopie. Met het uitgebreide gebruik van de niet-menselijke primaten als een translationeel model, onze hoop is dat een beter begrip van het netvlies zal inzicht bieden in effectieve aanpak van verzachtende of het omkeren van de negatieve impact van visuele stoornissen op de kwaliteit van leven van de getroffen personen.
Protocol
Deel 1: Pre-verwerking van weefsel Weefsel moet goed worden geperfuseerd met paraformaldehyde, glutaaraldehyde, of formaline. Dit kan worden bereikt door middel van standaard transcardial perfusie meestal gebruikt om andere organen te oogsten. Het wordt aanbevolen dat kort na het offer van de ogen worden geïnjecteerd met een fixatief net onder de lens en opgeslagen in fixeermiddel. In de huidige studie het onderwerp was diep gesedeerd met ketamine hydrochloride (10 mg / kg, im), gedood met een over…
Discussion
De voorbereiding van het netvlies als een wholemount maakt voor de analyse van de topografie en de ruimtelijke verdeling van ofwel het ganglion cel laag of de endotheliale cellen van het netvlies bloedvaten 3. Kwantificering van de celdichtheid in de periferie van de retina wordt eenvoudig volbracht. Echter, in perifoveal en foveale regio's, de stapeling van meerdere lagen in het ganglion cellaag belemmert kwantificering. Om dit te omzeilen mogelijke vertekening, kan de fovea en perifoveal regio ontleed u…
Acknowledgements
De auteurs willen graag Ikiel Ptito bedanken voor zijn technische ondersteuning. We zijn dankbaar voor Frank Ervin, Roberta Palmour en het personeel van Gedragswetenschappen Stichting Laboratoria gevestigd in St. Kitts, West-Indië, voor hun blijvende steun van onze primaat werk.
Burke, M., Zangenehpour, S., Bouskila, J., Boire, D., Ptito, M. The Gateway to the Brain: Dissecting the Primate Eye. J. Vis. Exp. (27), e1261, doi:10.3791/1261 (2009).