酸性α-膨大诱导测量植物细胞壁扩展（蠕变）
Summary
我们证明一个恒定的力量引伸来衡量长期，延长植物细胞壁标本（蠕变）酸性缓冲区和膨大蛋白质引起的。
Abstract
日益严重的植物细胞壁的特征表现为“酸的增长”，我们的意思，他们是在低pH值（<5）1更具可扩展性着称的属性。植物激素生长素迅速刺激至少有一部分细胞伸长酸增长机制，2，3，幼茎和类似组织。生长素激活的H +泵的质膜，造成细胞壁溶液酸化。长城酸化激活expansins，这是内源性的细胞壁松蛋白 4，导致细胞壁产生细胞膨压在墙壁上创建的紧张局势。因此，细胞开始迅速放大。这“酸增长”的现象很容易测量隔离（非生物）细胞壁标本。细胞壁的能力进行酸诱导延伸不是单纯的细胞壁多糖（如果胶）的结构安排的结果，而是取决于活动 expansins 5。 Expansins没有任何已知的酶的活性，并检测膨大活动的唯一途径，是衡量其细胞壁扩展的感应。这个视频报告的细节膨大实验获得合适的墙体材料的来源和制备技术及酸诱导的延伸和膨大诱导墙样品准备种植黄瓜下胚轴的延伸。
要获得适当的细胞壁样品，黄瓜幼苗在黑暗中生长，胚轴削减和冻结在-80 ° C。冷冻胚轴磨损，夷为平地，然后在引伸计测量的一个特殊的比色皿的恒张力夹紧。为了测量酸诱导的延伸，墙壁最初在中性pH缓冲，导致在低活动expansins本地细胞壁的组成部分。当酸性pH值的缓冲液交换，expansins被激活和细胞壁迅速扩大。我们也证明了一个重组实验膨大活动。对于这部分，我们使用一个简短的热处理，在细胞壁样变性的原生expansins。这些灭活的细胞壁不延长，甚至在酸性的缓冲，但除了细胞壁expansins迅速恢复他们的能力，延长。
Protocol
Discussion
对于本演示中，我们用黄瓜下胚轴细胞壁，因为他们已经被证明是一个可靠的来源，很容易处理，并具有良好的灵敏度，响应墙样品。我们也有过良好的成功与其他树苗以及一些材料从超市，如年轻的菠菜叶和芹菜，墙壁。基本上，年轻，柔软，生长迅速的植物组织有可能使用这种技术可以很容易地测量，但坚韧，老，氧化或nongrowing的植物组织都不太可能因为细胞壁交联反应。有一些其他的东西…
Acknowledgements
这里显示的技术开发资金从能源部生物能源科学和国家科学基金会的赠款。
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