Fare Meme Epitel Hücreleri lactogenic Farklılaşma sırasında Mammospheres formu
Summary
HC11 lactogenic farklılaşma mammospheres olarak anılacaktır kubbeli yapıların oluşumu ile karakterize edilebilir. Yapılar, faz kontrast mikroskobu ile numaralandırılan lactogenic farklılaşma niceleme yardımcı olabilir.
Abstract
Fare meme epitel hücre kültürlerinde lactogenic farklılaşma derecesini belirlemek için yaygın olarak kullanılan fenotipik önlem mammospheres olarak anılacaktır kubbe şeklinde hücre yapılarının oluşması.<sup> 1</sup>. HC11 hücre hattı meme lactogenic farklılaşma hem yönetmelik çalışması için bir model sistem olarak istihdam edilmektedir.<em> In vitro</em> Ve<em> In vivo</em<sup> 2</sup>. HC11 hücreleri lactogenic hormonları ile tedaviye yanıt olarak ayırt etmek ve süt proteinleri sentezlerler. Izdiham HC11 fare meme epitel hücreleri büyüme, lactogenic farklılaşma, deksametazon, insülin ve prolaktin lactogenic hormonlar da dahil olmak üzere bir kombinasyonun eklenmesi ile indüklenen olarak DIP anılacaktır. HC11 hücreleri ayırt etmek için uyarılan 120 saat farklılaşma indüksiyon ve numaralandırılan oldu her kültürün ortaya çıktı mammospheres kez fotoğraflandı. Bireysel mammospheres boyutu farklılaşma derecesi ile ilişkilidir ve bu görüntüleri ayırt hücrelerinin tasvir edilmiştir.
Protocol
Discussion
Amacıyla bu tekniğin başarılı olmak ve en iyi kalite, epitel hücreleri lactogenic hormonları ile indüklenen önce izdiham muhafaza edilmelidir. Ölçülmesi zor kılan pek çok mammospheres vardır durumlar olabilir. Böylece, kantitatif amaçlar için mammospheres sayısı sayılacak bir zaman noktasında mammospheres fotoğraflamak için en iyisidir.
Meme epitel hücrelerinin lactogenic farklılaşma derecesini belirlemek için kullanılan çeşitli moleküler belirteçlerin bulunm…
Acknowledgements
Congressionally Yönetmen Tıbbi Araştırma Fonu hibe (DAMD17-01-0264) ML Cutler ve ML Cutler Amerika Birleşik Devletleri Askeri Kanser Enstitüsü Fonları çalışmaları destekledi.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| RPMI | Invitrogen | 21870076 | ||
| Fetal Bovine Serum | Atlanta Biologicals | S11550 | ||
| L-Glutamine | Gibco | 25030 | ||
| PenStrep | Gibco | 15140 | ||
| Hepes | Quality Biologicals | 118089060 | ||
| EGF | Sigma | E9644 | ||
| Insulin | Gibco | 12585-014 | ||
| Dexamethasone | Sigma | D1756 | ||
| Microscope | Olympus | IX71 | ||
| Digital Camera | QImaging | Retiga 2000RV Fast 1394 |
References
- Blatchford, D. R., Hendry, K. A., Turner, M. D., Burgoyne, R. D., Wilde, C. J. Vectorial secretion by constitutive and regulated secretory pathways in mammary epithelial cells. Epithelial Cell Biol. 4, 8-16 (1995).
- Wang, W. Glucocorticoid induced expression of connective tissue growth factor contributes to lactogenic differentiation of mouse mammary epithelial cells. J Cell Physiol. 214, 38-46 (2008).
