Summary

إعداد موحدة وحيدة الخلية معلقات من أنسجة الرئة باستخدام الماوس Dissociator gentleMACS

Published: July 02, 2009
doi:

Summary

الفصل بين أنواع خلايا من نسيج معين يتطلب بارامترات محددة للتحريض الأنسجة للحصول على كميات كبيرة من الخلايا ، قابلة للحياة زروع. وgentleMACS Miltenyi dissociator يحسن هذه المهمة مع بروتوكول بسيطة وعملية. هذا المنشور هو شرح استخدام هذا الجهاز عن نسيج الرئة.

Abstract

إعداد وحيدة الخلية تعليق من الأنسجة شرطا مسبقا هاما لكثير من التجارب في مجال البحوث الخلوية. عملية الفصل بين أجهزة كله يتطلب المعلمات محددة من أجل الحصول على عدد كبير من خلايا قابلة للحياة بطريقة استنساخه. وDissociator gentleMACS يحسن هذه المهمة مع بروتوكول بسيطة وعملية. الأداة مبرمجة مسبقا يحتوي على الإعدادات التي هي الأمثل للكفاءة ولكن لطيف تفارق من مجموعة متنوعة من أنواع الأنسجة ، بما في ذلك الرئتين الماوس. في هذا المنشور ويتجلى استخدام Dissociator gentleMACS على أنسجة الرئة المستمدة من الفئران.

Protocol

على العمل تحت ظروف معقمة ، فمن المستحسن لتنفيذ كافة الخطوات في تدفق الصفحي هود. 1. المواد HEPES العازلة : 10 مم HEPES – هيدروكسيد الصوديوم الهيدروجيني 7.4 ، 150 مم كلوريد الصوديوم ، 5 ملي بوكل …

Discussion

في هذا الفيديو ، نقدم طريقة جديدة للتفكك أنسجة الرئة الماوس. نظهر أن الجمع بين المعالجة الميكانيكية والأنزيمية للأنسجة الرئة حققت نسبة عالية من الكريات البيض قابلة للحياة والخلايا البطانية. على وجه التحديد ، وقد تحقق تفكك الميكانيكية للأنسجة التي Dissociator gentleMACS. جيم أ…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

الكتاب هم من موظفي شركة محدودة Miltenyi بيوتيك ، ألمانيا.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
C Tubes   Miltenyi Biotec Order no. 130-093-237 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_709_765_gentleMACS_C_Tubes.aspx
gentleMACS™ Starting Kit   Miltenyi Biotec Order no. 130-093-235 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_709_763_gentleMACS_Dissociator.aspx
MACSmix™ Tube Rotator   Miltenyi Biotec Order no. 130-090-753 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_34_251_MACSmix_Tube_Rotator.aspx
autoMACS™ Rinsing Solution   Miltenyi Biotec Order no. 130-091-222 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_134_155_autoMACS_Rinsing_Solution.aspx
MACS® BSA Stock Solution   Miltenyi Biotec Order no. 130-091-376 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_33_295_MACS_BSA_Stock_Solution.aspx
CD11c MicroBeads   Miltenyi Biotec Order No. 130-052-001 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_93_132_CD11c_MicroBeads.aspx
CD11c-FITC, CD11c-PE   Miltenyi Biotec Order no. 130-092-026 130-091-830 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_329_CD11c.aspx
Anti-mPDCA-1-APC   Miltenyi Biotec Order no. 130-091-963 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_325_Anti_mPDCA_1.aspx
CD146-FITC   Miltenyi Biotec Order no. 130-092-026 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_417_CD146_LSEC_.aspx
CD45-PE   Miltenyi Biotec Order no. 130-091-610 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_599_331_CD45.aspx
Propidium Iodide Solution   Miltenyi Biotec Order no. 130-093-233 http://www.miltenyibiotec.com/en/PG_337_744_Propidium_Iodide_Solution.aspx
Art 1000 Reach Pipet Tips   Molecular BioProducts Order no. 2079 http://www.mbpinc.com/ASP/products.aspx?query_TipID=61
http://www.mbpinc.com/html/products/art/display.html
check_url/kr/1266?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Jungblut, M., Oeltze, K., Zehnter, I., Hasselmann, D., Bosio, A. Standardized Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Lung Tissue using the gentleMACS Dissociator. J. Vis. Exp. (29), e1266, doi:10.3791/1266 (2009).

View Video